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1、目的:統(tǒng)計(jì)資料顯示下腰痛和坐骨神經(jīng)痛發(fā)病率越來高,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量并給患者及社會(huì)帶來了巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。腰椎間盤退行性變是引起下腰痛和坐骨神經(jīng)痛的主要原因之一,目前沒有理想的手術(shù)方式及保守治療方法來緩解疼痛癥狀。因此探究腰椎間盤退變的病例機(jī)制及減緩腰椎間盤退變病程發(fā)展具有重大的意義,研究表明基質(zhì)金屬蛋白酶及炎癥因子在腰椎間盤退變中發(fā)揮重大作用,本論文為研究ADAMTS-7及TNF-α在椎間盤組織中的表達(dá)規(guī)律及其在腰椎間盤組織退變過程中
2、的作用。
方法:選取2013年12月-2014年5月山東大學(xué)齊魯醫(yī)院骨外科住院的50例患者,據(jù)Thompson分級(jí)分為3組:對(duì)照組(Control,n=5):來自脊柱爆裂骨折患者且其椎間盤組織突出合并神經(jīng)癥狀需行椎管減壓+內(nèi)固定術(shù),MRI顯示無明顯退變;二級(jí)組(GradeⅡ,n=20);四級(jí)組(GradeⅣ,n=25)。分別采用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)、RT-PCR技術(shù)以及蛋白質(zhì)印跡技術(shù)對(duì)三組樣本的髓核組織進(jìn)行腫瘤壞死因子α(TN
3、F-α)和血小板凝血酶敏感蛋白樣模體的解整鏈蛋白金屬蛋白酶7(ADAMTS-7)進(jìn)行定性、定量檢測(cè)。
選取200g-250g Wister大鼠30只隨機(jī)分成兩組:對(duì)照組(Control group,n=10)、實(shí)驗(yàn)組(Experimental group,n=20)。對(duì)實(shí)驗(yàn)組大鼠行腰椎間盤針刺構(gòu)建退變模型,4周后,對(duì)病變間盤髓核組織及對(duì)照組相應(yīng)間盤髓核組織采用組織免疫化學(xué)染色技術(shù)、RT-PCR技術(shù)以及蛋白質(zhì)印跡技術(shù)進(jìn)行TNF-
4、α、ADAMTS-7進(jìn)行定性、定量檢測(cè)。
對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行各組之間比較,行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:1、免疫組織化學(xué)技術(shù)、RT-PCR技術(shù)以及蛋白質(zhì)印跡技術(shù)均顯示人退變髓核組織TNF-α、ADAMTS-7的表達(dá)比正常髓核組織中的高(p<0.01),4級(jí)組TNF-α、ADAMTS-7的表達(dá)比2級(jí)組中的要高(p<0.01)。
2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果與人體髓核組織中結(jié)果基本一致。免疫組織化學(xué)技術(shù)、RT-PCR技術(shù)以及蛋白質(zhì)印跡
5、技術(shù)均顯示退變大鼠髓核組織TNF-α、ADAMTS-7的表達(dá)比正常髓核組織中的高(p<0.01)。
結(jié)論:TNF-α、ADAMTS-7均表達(dá)于正常的髓核組織和退變的髓核組織中,并且退變的越嚴(yán)重表達(dá)量越多。在退變的髓核組織中TNF-α、ADAMTS-7的表達(dá)量都增加說明其與椎間盤的退變有密切的聯(lián)系,有研究表明TNF-α、ADAMTS-7在骨性關(guān)節(jié)炎中表達(dá)呈現(xiàn)正反饋通路加速其病程進(jìn)展,因此在椎間盤退變過程中可能也存在這樣的通路加速
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