大鼠帶瓣血管凍存時間對其活性與Bax、Bcl-2基因表達的影響.pdf

1、先天性心臟病發(fā)病率占存活嬰兒的6‰-8‰，其中復雜先天性心臟病占0.5‰-2‰。大量復雜先天性心臟病例需生物或人工材料，如同種帶瓣血管，異種帶瓣血管及其他類型的帶瓣血管等，重建成右(左)室流出道得到糾治。同種帶瓣血管因其結構自然，中心血流、抗反流、免疫原性低、不易形成血栓、不易附著細菌等優(yōu)點，在復雜先天性心臟病治療的應用范圍越來越廣。有活性的同種帶瓣血管與無活性的人工帶瓣血管及其他類型的血管相比，因其具有一定程度的細胞生長能力，遠期瓣膜

2、失功幾率低，鈣化狹窄發(fā)生幾率低及血管的使用壽命時間長等特點，因此保存同種帶瓣血管的活性是實驗研究的方向。保存同種帶瓣血管的活性關鍵是在帶瓣血管的獲取、處理、降溫、保存及復溫過程中盡量減少帶瓣血管細胞的壞死和凋亡。作為促進細胞凋亡的Bax基因與抑制細胞凋亡的Bcl-2基因，已經(jīng)有研究證實Bax基因表達可以促進在缺血再灌注損傷模型中心肌細胞的凋亡；而在誘導大鼠心肌凋亡的研究中Bcl-2基因的表達則減少了心肌細胞的凋亡。以往很多研究是通過檢測

3、葡萄糖代謝率等方法檢測帶瓣血管的活性，這些方法均是從細胞代謝水平來檢測帶瓣血管活性而不是基因與蛋白水平的檢測方法，因此我們探討在基因與蛋白水平檢測帶瓣血管經(jīng)凍存不同時間后的活性。
　　 目的：研究在大鼠帶瓣血管低溫保存不同時間活性及Bax和Bcl-2基因的表達情況，探討基因檢測是否能成為同種帶瓣血管活性指標。
　　 方法：80只wistar大鼠分為四組：新鮮血管20例(A組)，凍存3個月血管20例(B組)，凍存6個月血管

4、20例(C組)，凍存9個月血管20例(D組)。應用葡萄糖代謝法檢測帶瓣血管的代謝情況，鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶(streptavidinperoxidase，SP)免疫組織化學法檢測樣本中的Bax、Bcl-2蛋白的表達情況。
　　 結果：
　　 1、光鏡檢查各組帶瓣血管的三層結構均存在，彈性存在。A組和B組血管的內(nèi)皮細胞層完整，連接緊密，脫落不明顯，細胞核清楚可見，纖維層排列緊密，C組及D組內(nèi)皮層出現(xiàn)局部分層，局部

5、的細胞脫失，細胞連接不緊密，纖維層排列緊密。
　　 2、各組間葡萄糖代謝率結果差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 3、大鼠帶瓣血管的Bax蛋白陽性率隨著凍存時間的延長而增加，血管的Bcl-2蛋白陽性率與凍存時間長短無關。
　　 結論：
　　 1、經(jīng)液氮保存3、6、9個月后的大鼠帶瓣血管與新鮮的大鼠帶瓣血管葡萄糖代謝率結果無顯著性差異(P＜0.05)，提示經(jīng)凍存后帶瓣血管活性存在。
　　 2、