STR優(yōu)化位點及多重PCR技術在快速產(chǎn)前診斷中的臨床應用.pdf

1、目的：
　　1.選擇并驗證適用于漢族人群特點的13、18、21、X、Y染色體短串聯(lián)重復序列（short tandem repeats STR）位點；
　　2.對所選擇位點的擴增條件進行優(yōu)化，使其以熒光定量聚合酶鏈反應技術（quantitative fluorescent polymerase chain reaction，QF-PCR），并在一個反應體系內完成檢測；
　　3.應用于胎兒常見染色體非整倍體的快速產(chǎn)前診斷，

2、并對其檢測有效性進行臨床驗證
　　方法：
　　1.通過文獻檢索方式確認符合漢族人群特點的13、18、21、X、Y染色體短串聯(lián)重復序列位點；
　　2.通過48個正常漢族人樣本的多態(tài)性分析，評估位于13、18、21、X、Y染色體上STR位點的多態(tài)信息含量，挑選遺傳多態(tài)性高的STR位點，并優(yōu)化成一個檢測體系；
　　3.通過136例臨床樣本評價該檢測體系對常見染色體非整倍體檢測的效率，并與染色體核型分析結果進行比對，評價

3、所建立檢測方法的有效性。
　　結果：
　　1.通過雜合度測試優(yōu)選出14個STR位點，分別為：D13S258(0.88)、D13S305(0.90)、D13S634(0.92)、D13S742(0.83)、D18S535(0.81)、D18S1002(0.69)、D18S386(0.75)、D18S391(0.77)、D21S1435(0.75)、D21S1412(0.94)、D21S1446(0.58)、D21S1414(0

4、.85)、DXS7132(0.77)、DXY218(0.71)，及性染色體定性定量特異性非STR位點AMXY、SRY、TAF9B等共17個位點；
　　2.通過引物調整、擴增條件的優(yōu)化，獲得一個多重擴增體系完成所有位點的QF-PCR檢測；
　　3.將該體系應用于136例羊水、臍血、CVS樣本，共檢出38例染色體數(shù)目異常，其中17例21三體，4例13三體，12例18三體，1例47，XXX，2例45，XO，1例47，XXY,1例4