鄭州地區(qū)醫(yī)院病人環(huán)孢子蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查及分子遺傳特性初步研究.pdf

1、環(huán)孢子蟲(chóng)（Cyclospora）為艾美球蟲(chóng)科(Eimeriidae)環(huán)孢子蟲(chóng)屬(Cyclospora)成員，在世界范圍內(nèi)流行傳播，具廣泛宿主。環(huán)孢子蟲(chóng)為一種新近發(fā)現(xiàn)的腸道寄生原蟲(chóng)，主要寄生于宿主小腸的上皮細(xì)胞，可引起宿主食欲減退、體重減輕、持續(xù)性腹瀉、腸痙攣及其它胃腸炎等臨床癥狀。免疫功能止常者感染環(huán)孢子蟲(chóng)后主要引起白限性腹瀉，而對(duì)于免疫抑制者或免疫功能缺陷者，感染環(huán)孢子蟲(chóng)后則可致持續(xù)性腹瀉甚至死亡。近年來(lái)，環(huán)孢子蟲(chóng)病受到國(guó)內(nèi)外越來(lái)越多

2、研究人員的廣泛關(guān)注和重視。2008年7月劍2010年1月，采用福爾馬林-乙酸乙酯沉淀法、飽和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法對(duì)河南省鄭州地區(qū)3家醫(yī)院的病人進(jìn)行環(huán)孢子蟲(chóng)的感染情況進(jìn)行調(diào)查，共發(fā)現(xiàn)環(huán)孢子蟲(chóng)感染者29例。用PCR方法對(duì)其18SrRNA基因和ITS-1基因擴(kuò)增，序列比對(duì)結(jié)果經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)化發(fā)育分析，所獲環(huán)孢子蟲(chóng)蟲(chóng)株均屬于卡耶塔環(huán)孢子蟲(chóng)。
　　 本次試驗(yàn)共調(diào)查5285名病人，總感染率為0.5％(29/5825)。其中，河南省人民醫(yī)

3、院、鄭州市兒童醫(yī)院和鄭州大學(xué)三附院病人環(huán)孢子蟲(chóng)感染率分別為0.5%(22/4836)、0.5%(3/608)和1.0%(4/381):春季、夏季、秋季和冬季環(huán)孢子蟲(chóng)感染率分別為0.0%(0/823)、1.0%(21/2017)、0.4%(8/1878)和0.0%(0/567)，表明環(huán)孢子蟲(chóng)感染與季節(jié)具有明顯相關(guān)性(P＜0.01)；此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)各個(gè)年齡段均發(fā)現(xiàn)有環(huán)孢子蟲(chóng)感染，其中以0～17歲和60歲以上感染率較高，表明環(huán)孢子蟲(chóng)感染與年齡具

4、有相關(guān)性(P＜0.05)；男性的環(huán)孢子蟲(chóng)感染率為0.6%(19/3154)，女性的感染率為0.5%(10/2131)，表明環(huán)孢子蟲(chóng)感染與性別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。100倍光學(xué)顯微鏡下測(cè)量50個(gè)環(huán)孢子蟲(chóng)卵囊，大小為7.5μm×7.5μm。
　　 基于18SrRNA基因和ITS-1基因?qū)?9個(gè)環(huán)孢子蟲(chóng)陽(yáng)性樣品進(jìn)行巢式PCR擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增出的29個(gè)環(huán)孢子蟲(chóng)樣品的18SrRNA基因和7個(gè)環(huán)孢子蟲(chóng)樣品的ITS-1基因進(jìn)行測(cè)序，拼接比

5、對(duì)后的序列通過(guò)NCBI、EMBL和DDBJ三大分子生物學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)搜索同源序列，然后運(yùn)用ClustalXl.81、Phylip3.64和DNAstar5.0等分子生物學(xué)軟件對(duì)所獲得的序列進(jìn)行比對(duì)分析、構(gòu)建分子進(jìn)化樹(shù)。基于18SrRNA基因位點(diǎn)分析，結(jié)果表明29個(gè)人源環(huán)孢子蟲(chóng)樣品與C.cayetanensis進(jìn)化關(guān)系最為接近，僅存在兩個(gè)堿基差異。而根據(jù)在ITS-1基因位點(diǎn)種系進(jìn)化分析，表明同一地理位置的分離株同源性較高。
　　 本研究