腫瘤轉移的免疫生物學機制和免疫治療——靶向攻擊TLR2或CD19抑制腫瘤細胞肺轉移.pdf

1、惡性腫瘤嚴重危害公眾健康，是全球范圍導致死亡的主要原因，而90％以上的癌癥患者死于腫瘤轉移。腫瘤局部的抑制性免疫微環(huán)境是腫瘤細胞逃避宿主免疫監(jiān)視、進行性生長和轉移的關鍵因素，也是目前腫瘤常規(guī)治療失敗的重要原因。抑制性免疫微環(huán)境主要由抑制性免疫細胞、細胞因子、趨化因子及酶類組成。細胞核轉錄因子Stat3在抑制性免疫微環(huán)境形成過程中發(fā)揮了關鍵作用。例如，腫瘤細胞的Stat3組成性活化不僅可主動誘導腫瘤局部抑制性免疫微環(huán)境形成，其轉錄產(chǎn)物也促

2、進腫瘤生長和轉移。但是，腫瘤細胞如何維持Stat3組成性活化的機制則仍然沒有得到闡明。最近的研究提示，腫瘤細胞可以主動或被動釋放大量損傷相關分子模式（DAMP）分子，激活模式識別受體（PRRs），激活或抑制相應的細胞信號傳導通路，引發(fā)相應的細胞生物學反應，包括誘導炎癥反應、刺激血管新生和基質重構，參與抑制性免疫微環(huán)境形成，既促進腫瘤細胞增殖和轉移，也是腫瘤免疫微環(huán)境形成的重要機制。
　　 TLRs是一組重要的PRRs，既介導病原

3、相關分子模式（PAMPs）分子也介導DAMPs引起的免疫反應。同樣的抗原與某些TLR亞型相互作用引起免疫增強反應而與另外的TLR亞型相互作用引起免疫耐受。例如，同樣的抗原與TLR4相互作用引起免疫刺激反應而激活TLR2可誘導抑制性免疫反應。因此，我們假設TLR2可能與腫瘤細胞的DAMPs相互作用，介導腫瘤細胞Stat3組成性活化，導致抑制性免疫微環(huán)境形成。首先，我們證明了人類及小鼠的多種腫瘤細胞表達多種TLRs；利用Pg-LPS激活腫瘤

4、細胞TLR2信號，可誘導腫瘤細胞Stat3活化，產(chǎn)生大量IL-6、IL-10等抑制性細胞因子。進一步實驗證明腫瘤細胞可通過主動釋放HSP60，持續(xù)活化腫瘤細胞TLR2信號，維持Stat3的組成性活性，從而形成一種正反饋機制，維持TLR2-Stat3信號系統(tǒng)活化和抑制性免疫微環(huán)境形成。無論是阻斷腫瘤細胞的TLR2活性，還是阻斷宿主的TLR2活性，均可顯著抑制Stat3活性，逆轉肺組織局部抑制性免疫微環(huán)境，減少B16F10黑色素瘤細胞肺轉移

5、，提高荷瘤動物生存率。我們的研究結果不僅證明，模式識別受體TLR2活化是腫瘤細胞引起免疫耐受的重要原因，也強烈提示TLR2是開發(fā)防治腫瘤生長和轉移藥物的藥靶。
　　 CD19是重要的B細胞標志分子。我們的前期工作發(fā)現(xiàn)黑色素細胞瘤也表達CD19。因最近有研究提示CD19是B細胞TLR信號通路中重要的接頭分子，而我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)激活TLR2是腫瘤細胞Stat3組成性活化的重要原因。因此，我們假設CD19通過與腫瘤組織產(chǎn)生的某些DAMPs

6、分子相互作用，引起腫瘤細胞核轉錄因子Stat3組成性活化，促進腫瘤生長和轉移。我們發(fā)現(xiàn)，B16F10黑色素瘤細胞膜表面的CD19介導了HSP60通過TLR2所致Stat3組成性活化這一過程；阻斷CD19可抑制腫瘤細胞自身釋放的HSP60所誘導的Stat3活化，下調(diào)MMP-2、VEGF及c-Myc等促癌蛋白表達，抑制腫瘤細胞上皮.間葉轉化（EMT），抑制IL-10等抑制性細胞因子分泌。因此，無論是預防性，還是治療性給予中和性CD19抗體，