蓇密牌鈣片與馬鹿角對(duì)成骨細(xì)胞增殖分化及其對(duì)OPG---小鼠的體內(nèi)作用的研究.pdf

1、目的：觀察蓇密牌鈣片及馬鹿角對(duì)鼠胚成骨細(xì)胞MC3T3-E1的增殖分化作用及細(xì)胞內(nèi)OPG、RANKLmRNA的表達(dá)；觀察蓇密牌鈣片及馬鹿角對(duì)OPG-/-小鼠的骨密度及骨代謝生化指標(biāo)的作用。方法：采用MEM（10%FBS）培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)法描繪成骨細(xì)胞生長(zhǎng)曲線；MTT法檢測(cè)蓇密牌鈣片（0、50、100、500、1000μg/ml）、馬鹿角（0、5、50、500μg/ml）和鈣爾奇D陽(yáng)性對(duì)照組對(duì)鼠胚成骨細(xì)胞MC3T3-E1增殖的作用；

2、蓇密牌鈣片（0、50、100、500、1000μg/ml）、馬鹿角（0、5、50、500μg/ml）和鈣爾奇D陽(yáng)性對(duì)照組干預(yù)鼠胚成骨細(xì)胞MC3T3-E1 72h后，比色法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)的含量，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate-resistant acid phosphatase form 5b，TRACP5b)的含量，RT-PCR法檢測(cè)骨保護(hù)蛋白(osteo

3、protegerin,OPG)、核因子КB激活受體配體(receptor activator of NK –КB ligand,RANKL)mRNA的表達(dá)。以O(shè)PG基因敲除純合子(homozygous OPG knockout ,OPG-/- )小鼠為研究對(duì)象，蓇密牌鈣片、馬鹿角及鈣爾奇D分別給各組OPG-/-小鼠連續(xù)灌胃30天，酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清中TRACP5b的含量，競(jìng)爭(zhēng)放射免疫法測(cè)定血清中骨鈣素（Bone–γcarboxyglu

4、tamic acid, BGP）的含量；雙能x線骨密度儀（Dual Engergy X-ray Absorbtiometry，DEXA）測(cè)定股骨和總體的骨密度（Bone mineral density，BMD）。結(jié)果：蓇密牌鈣片及馬鹿角作用于MC3T3-E1成骨細(xì)胞72h后，可促進(jìn)其增殖，OD值增加（P＜0.05），降低TRACP5b的含量、增加ALP的含量，促進(jìn)OPGmRNA表達(dá)，同時(shí)抑制RANKLmRNA表達(dá)。蓇密牌鈣片及馬鹿角能增