小鼠氣道平滑肌高反應(yīng)性和重構(gòu)中的TRPC3高表達(dá)及其藥物干預(yù).pdf

1、本文主要從以下幾方面展開論述：
　　第一部分OVA誘導(dǎo)小鼠氣道高反應(yīng)性和重構(gòu)平滑肌中的TRPCs表達(dá)變化及其藥物干預(yù)
　　目的：探討氣道平滑肌TRPCs蛋白表達(dá)與小鼠氣道高反應(yīng)性和重構(gòu)之間的關(guān)系。
　　方法：卵清蛋白（OVA）致敏建立昆明小鼠哮喘模型；肺組織HE染色，氣道平滑肌組織Masson染色和羥脯氨酸含量測定，離體氣管環(huán)張力實驗等評價氣道重構(gòu)和氣道高反應(yīng)性；Western blot檢測氣道平滑肌組織TRPC1,3

2、,6,7蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：①OVA誘導(dǎo)小鼠在激發(fā)階段出現(xiàn)呼吸加深加快，口唇發(fā)紺，點頭呼吸等哮喘急性發(fā)作表現(xiàn)。②與對照組相比，哮喘組小鼠氣道周圍炎細(xì)胞浸潤，氣道壁明顯增厚，氣道平滑肌周圍膠原沉積，氣道平滑肌組織羥脯氨酸含量明顯增加；哮喘組小鼠離體氣管環(huán)對乙酰膽堿（ACh）的反應(yīng)顯著增加。③小鼠氣道平滑肌組織TRPC1,3,6,7蛋白均有表達(dá)，與對照組相比，哮喘組小鼠氣道平滑肌組織TRPC3蛋白表達(dá)明顯增加；④TRPC阻斷劑GdC

3、l3可明顯抑制ACh引起的氣道平滑肌組織收縮；⑤氨茶堿（100μM）和異蓮心堿（50μM）可明顯抑制ACh引起的離體氣道平滑肌收縮，地塞米松（1μM）此作用不明顯；⑥地塞米松（3mg/kg）和異蓮心堿（3mg/kg）連續(xù)給藥五天可明顯降低哮喘小鼠氣道平滑肌組織羥脯氨酸含量，氨茶堿（20mg/kg）此作用不明顯；⑦地塞米松，異蓮心堿和氨茶堿連續(xù)給藥五天均不影響哮喘小鼠氣道平滑肌組織TRPC3蛋白表達(dá)。
　　第二部分增殖氣道平滑肌細(xì)胞

4、中的TRPC3表達(dá)變化
　　目的：探討TRPC3蛋白在增殖氣道平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)變化。
　　方法：酶解法分離氣道平滑肌細(xì)胞用于原代培養(yǎng)；MTT法檢測氣道平滑肌細(xì)胞增殖程度；Western blot檢測氣道平滑肌細(xì)胞TRPC3蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：10％FBS明顯刺激氣道平滑肌細(xì)胞增殖并且明顯增加TRPC3蛋白表達(dá)，3μM GdCl3能明顯抑制氣道平滑肌細(xì)胞增殖。
　　結(jié)論：TRPC3蛋白表達(dá)增加參與哮喘小鼠氣道平