無創(chuàng)法測量小鼠氣道高反應性.pdf

1、研究背景:我們對于呼吸疾病的認識,大多都是從動物實驗中得到的.最典型的一個例子就是,對很多動物包括人類的研究表明,肺的炎癥反應與氣道的高反應性是有關的.小鼠被廣泛的用于呼吸疾病的研究中是有很多優(yōu)勢所決定的,包括:對于小鼠的免疫系統(tǒng)有了一定的認識,大量的試劑可以在小鼠身上使用,小鼠較短的繁殖周期,對于小鼠基因組的充分認識,轉基因技術的出現(xiàn),以及價格便宜等經(jīng)濟方面的優(yōu)勢.然而小鼠的體積決定了測量小鼠肺通氣功能需要克服一系列的難題. 目前測量

2、小鼠氣道反應性的方法多種多樣,從無創(chuàng)到有創(chuàng),各種方法各有利弊.目前無創(chuàng)測量的最常用的是Penh(enhanced pause)的測定.Penh的測量是將小鼠自由的放置于一容器內,僅測量容器內壓力的變化.容器內的壓力隨著小鼠的呼吸而變化,壓力的變化就用來衡量小鼠的肺通氣功能,這就最大可能的避免了人為因素對測量結果的影響.但Penh是通過容器壓力變化間接反映小鼠氣道的反應性,并不是一個直接測定的結果.在進行Penh的測量時,體描箱內壓力變化

3、是其基礎值,容易受到很多因素如小鼠的運動、小鼠的潮氣量、功能殘氣量以及氣體的溫度、濕度等的影響.因此,與其說是反映通氣功能,不如說Penh反映小鼠的通氣模式更為恰當(如呼吸頻率、潮氣量).以上因素一定程度上限制了Perth反映小鼠通氣功能的特異性和準確性.相對于無創(chuàng)法來說,有創(chuàng)法是測量小鼠的肺阻力.測量小鼠肺阻力,需要控制小鼠的呼吸頻率、潮氣量等參數(shù),因此是目前測量小鼠通氣功能最為精確的方法.但是,這種方法對于小鼠的操作較多,需要氣管插

4、管等,小鼠在測量時所處的狀態(tài)與它的自然狀態(tài)差異很大. 研究目的:在我們成熟的哮喘模型基礎上,應用有創(chuàng)和無創(chuàng)的方法,在同一小鼠上測量其氣道高反應性(Airway hyperresporlsiveness,AHR),并觀察了糖皮質激素地塞米松干預后的AHR改變情況. 研究方法:選擇健康雄性的C57BL/6小鼠,6～8周齡,體重18-22g.以卵白蛋白(OVA)作為抗原進行兩次腹腔注射致敏和三次霧化吸入激發(fā),建立哮喘模型,同時

5、設立空白對照組(以生理鹽水代替OVA),以及地塞米松治療組(造模程序同OVA組,在OVA激發(fā)前每只小鼠腹腔注射溶于0.2ml生理鹽水的地塞米松25ug).在造模的第27天行無創(chuàng)測量,第28天進行有創(chuàng)的氣道反應性測量. 研究結果: Penh和肺阻力測量結果,無論在不同激發(fā)藥物之間,還是不同組間,其主效應均存在顯著性差異,尤其是激發(fā)主效應(P<0.001). Pearson相關性分析結果顯示,Penh和肺阻力指標具有