無(wú)創(chuàng)法測(cè)量小鼠氣道高反應(yīng)性.pdf

1、研究背景:我們對(duì)于呼吸疾病的認(rèn)識(shí),大多都是從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中得到的.最典型的一個(gè)例子就是,對(duì)很多動(dòng)物包括人類的研究表明,肺的炎癥反應(yīng)與氣道的高反應(yīng)性是有關(guān)的.小鼠被廣泛的用于呼吸疾病的研究中是有很多優(yōu)勢(shì)所決定的,包括:對(duì)于小鼠的免疫系統(tǒng)有了一定的認(rèn)識(shí),大量的試劑可以在小鼠身上使用,小鼠較短的繁殖周期,對(duì)于小鼠基因組的充分認(rèn)識(shí),轉(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn),以及價(jià)格便宜等經(jīng)濟(jì)方面的優(yōu)勢(shì).然而小鼠的體積決定了測(cè)量小鼠肺通氣功能需要克服一系列的難題. 目前測(cè)量

2、小鼠氣道反應(yīng)性的方法多種多樣,從無(wú)創(chuàng)到有創(chuàng),各種方法各有利弊.目前無(wú)創(chuàng)測(cè)量的最常用的是Penh(enhanced pause)的測(cè)定.Penh的測(cè)量是將小鼠自由的放置于一容器內(nèi),僅測(cè)量容器內(nèi)壓力的變化.容器內(nèi)的壓力隨著小鼠的呼吸而變化,壓力的變化就用來(lái)衡量小鼠的肺通氣功能,這就最大可能的避免了人為因素對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響.但Penh是通過(guò)容器壓力變化間接反映小鼠氣道的反應(yīng)性,并不是一個(gè)直接測(cè)定的結(jié)果.在進(jìn)行Penh的測(cè)量時(shí),體描箱內(nèi)壓力變化

3、是其基礎(chǔ)值,容易受到很多因素如小鼠的運(yùn)動(dòng)、小鼠的潮氣量、功能殘氣量以及氣體的溫度、濕度等的影響.因此,與其說(shuō)是反映通氣功能,不如說(shuō)Penh反映小鼠的通氣模式更為恰當(dāng)(如呼吸頻率、潮氣量).以上因素一定程度上限制了Perth反映小鼠通氣功能的特異性和準(zhǔn)確性.相對(duì)于無(wú)創(chuàng)法來(lái)說(shuō),有創(chuàng)法是測(cè)量小鼠的肺阻力.測(cè)量小鼠肺阻力,需要控制小鼠的呼吸頻率、潮氣量等參數(shù),因此是目前測(cè)量小鼠通氣功能最為精確的方法.但是,這種方法對(duì)于小鼠的操作較多,需要?dú)夤懿?/p>

4、管等,小鼠在測(cè)量時(shí)所處的狀態(tài)與它的自然狀態(tài)差異很大. 研究目的:在我們成熟的哮喘模型基礎(chǔ)上,應(yīng)用有創(chuàng)和無(wú)創(chuàng)的方法,在同一小鼠上測(cè)量其氣道高反應(yīng)性(Airway hyperresporlsiveness,AHR),并觀察了糖皮質(zhì)激素地塞米松干預(yù)后的AHR改變情況. 研究方法:選擇健康雄性的C57BL/6小鼠,6～8周齡,體重18-22g.以卵白蛋白(OVA)作為抗原進(jìn)行兩次腹腔注射致敏和三次霧化吸入激發(fā),建立哮喘模型,同時(shí)

5、設(shè)立空白對(duì)照組(以生理鹽水代替OVA),以及地塞米松治療組(造模程序同OVA組,在OVA激發(fā)前每只小鼠腹腔注射溶于0.2ml生理鹽水的地塞米松25ug).在造模的第27天行無(wú)創(chuàng)測(cè)量,第28天進(jìn)行有創(chuàng)的氣道反應(yīng)性測(cè)量. 研究結(jié)果: Penh和肺阻力測(cè)量結(jié)果,無(wú)論在不同激發(fā)藥物之間,還是不同組間,其主效應(yīng)均存在顯著性差異,尤其是激發(fā)主效應(yīng)(P<0.001). Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示,Penh和肺阻力指標(biāo)具有