電穿孔介導的基因治療兔下頜骨牽引成骨模型建立與鑒定.pdf

1、瀘州醫(yī)學院碩士學位論文電穿孔介導的基因治療兔下頜骨牽引成骨模型建立與鑒定姓名：李盛華申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：廖毅吳國平20090401瀘州醫(yī)學院碩士研究生學位論文下頜骨的肌肉，暴露下頜骨。于下頜骨頦孔處，用微型電動鉆截開下頜骨，于下頜骨斷開處安放2cm牽引器，固定，逐層縫合組織。于術后3天開始牽引，每天08mm，連續(xù)牽引lO天后，將兔隨機分為3組：A組：質(zhì)粒電脈沖組，B組：質(zhì)粒組，c組：生理鹽水組。A、C組均施加電脈沖刺

2、激。B組只注射重組質(zhì)粒而不施加電刺激。各組分別于注射后34時、l天、3天、7天、14天處死動物，切取牽引區(qū)組織約04cmx04cm大小，立即行冰凍切片檢查，用熒光顯微鏡觀察GFP蛋白表達情況，從而檢測外源基因的表達。檢測兔血清肝功能指標丙氨酸轉氨酶(ALT)、天fj#氨酸轉氨酶(AST)和腎功能指標尿素氮(BuN)、肌酐(Scr)和心、肝、腎組織學檢查。結果：A組轉染新西蘭大白兔，34時可觀察到綠色熒光蛋白的表達，l天時增強，3天時表達

3、最強，其后開始逐漸下降，7天后表達減少，14天仍可觀察到微弱熒光。B組的表達時限與A組相同，但各時相點的表達強度明顯弱于A組，C組在各時間段均未觀察到綠色熒光蛋白的表達。3組肝腎功能指標兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(Po05)。結論：電穿孔介導的帶有熒光標記重組質(zhì)粒體內(nèi)轉染能夠在兔下頜骨牽引區(qū)組織內(nèi)表達，并且電穿孔能明顯提高重組質(zhì)粒的體內(nèi)轉染效率，說明電穿孔介導的重組質(zhì)粒體內(nèi)轉染兔下頜骨牽引成骨的動物模型是可行的，用于體內(nèi)實驗是安全的。關鍵