電穿孔介導的基因治療對下頜骨牽引成骨影響的初步研究.pdf

1、瀘州醫(yī)學院碩士學位論文電穿孔介導的基因治療對下頜骨牽引成骨影響的初步研究姓名：黎德平申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：郭力;吳國平20090401瀘州醫(yī)學院碩士研究生學位論文別于注射后1 天、3 天、7 天、1 4 天處死動物，切取牽引區(qū)組織約0 ．4 c m x 0 ．4 c m 大小，進行組織學檢查、電鏡觀察，C D 3 4 免疫組織化學染色進行微血管密度( m i c r o v e s s e ld e n s i t y

2、 ，M V D ) 檢測。結(jié)果：電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，A 、B 組血管內(nèi)皮細胞呈增殖活躍狀態(tài)：細胞呈梭狀，具有多個突起，基底膜完整，胞漿內(nèi)具有豐富的線粒體呈橢圓形或圓形；C 組多數(shù)血管內(nèi)皮細胞部分呈現(xiàn)退變和凋亡早期改變。免疫組化染色發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染后第1 天血管壁內(nèi)皮細胞漿C D 3 4 表達較弱；第3 ～1 4 天，牽引區(qū)肉芽組織血管內(nèi)皮細胞均出現(xiàn)C D 3 4 陽性表達。B 組C D 3 4 陽性表達較C 組強，A 組C D 3 4 陽性表達較B

3、 組強，C 組最弱( P < O ．0 5 ) ，各組各時間點差異顯著( P < 0 ．0 5 ) 。比較施加電穿孔的A 組、C 組和未施加電穿孔的B 組，A 組、B 組的C D 3 4 表達持續(xù)陽性且呈上升趨勢，而C 組C D 3 4 陽性表達維持在第1 天C D 3 4 陽性表達水平上平穩(wěn)波動。結(jié)論：電脈沖介導的p l R E S —h V E G F l 6 5 一E G F P 重組質(zhì)粒體內(nèi)轉(zhuǎn)染能夠促進牽引區(qū)早期微血

4、管的生成，使局部血管增生、滲入，增加骨斷端的血流量。提示其有刺激骨基質(zhì)合成和誘導細胞增殖分化等活性功能，從而對調(diào)節(jié)和促進骨的生長和修復過程具有重要作用。第二部分：電穿孔介導的基因治療對下頜骨牽引成骨影響的初步研究目的：探索電穿孔介導的基因治療對下頜骨D o 過程中牽引間隙新骨生成的影響，從而為促進下頜骨D O 新骨牛成，縮短牽引周期，減少并發(fā)癥提供新思路。方法：選用新西蘭大白兔5 0 只，沿雙側(cè)下頜骨邊緣切開皮膚，鈍性分離附著下頜骨的肌

5、肉，暴露下頜骨。于下頜骨頦孔處，用微型電動鉆截開下頜骨，于下頜骨斷開處安放2 c m 牽引器，固定，逐層縫合組織。于術(shù)后3 天開始牽引，每天0 ．8 m m ，連續(xù)牽引7 天后，將兔隨機分為5 組：A M ：在牽引區(qū)注射2 肛g ( 0 ．1 p ∥山) 重組質(zhì)粒p I R E S - h V E G F l 6 5 一h B M P 2 。B 組：在牽引區(qū)注射2 H g ( 0 ．1 l x g ／I - t 1 ) 重組質(zhì)粒p l