乙酰膽堿酯酶抗獨(dú)特型抗體的酶活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究培養(yǎng)上清及腹水中乙酰膽堿酯酶抗獨(dú)特型抗體的酶活性為臨床有機(jī)磷農(nóng)藥中毒的治療提供一條新途徑.方法:以乙酰膽堿酯酶(AchE)作為抗原免疫動(dòng)物,制備AchE的單克隆抗體;AchE的單克隆抗體是識(shí)別乙酰膽堿酯酶活性中心的單抗,AchE單抗是一種IgG1抗體,先用胃蛋白酶酶切,然后采用SPA親和層析柱進(jìn)行提取純化,利用木瓜蛋白酶酶切抗體,獲得純化的單抗Fab段(3F3);采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)測定Fab片段的活性;再

2、以3F3作為抗原,免疫小鼠,制備抗3F3獨(dú)特型抗體;通過ELISA法研究該單抗的乙酰膽堿酯酶活性.檢測結(jié)果組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn).結(jié)論:1.乙酰膽堿酯酶(AchE)具有良好的抗原性,可以以此為抗原制備單克隆抗體.2.乙酰膽堿酯酶單抗可經(jīng)胃蛋白酶水解成為(Fab')2及Fc'(Fab')2可作為抗原制備抗獨(dú)特型決定簇的抗體.3.乙酰膽堿酯酶抗獨(dú)特型抗體具有乙酰膽堿酯酶活性且培養(yǎng)上清、腹水中乙酰膽堿酯酶抗體酶活性隨稀釋度的增高而降低.乙酰膽

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