左旋-肉毒堿對(duì)糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨丟失模型大鼠骨密度和骨微結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的：左旋-肉毒堿（L-carnitine，LC）是一種必需營(yíng)養(yǎng)素，其主要生理作用是調(diào)節(jié)細(xì)胞能量的產(chǎn)生。本實(shí)驗(yàn)通過LC干預(yù)小鼠成骨細(xì)胞系MC3T3-E1，探討LC對(duì)無血清及糖皮質(zhì)激素（GC）誘導(dǎo)的MC3T3-E1凋亡的影響；以GC干預(yù)制備骨丟失大鼠模型，同時(shí)補(bǔ)充LC，觀察LC對(duì)骨丟失模型大鼠的骨密度（BMD）和骨微結(jié)構(gòu)的影響。 方法：（1）以MC3T3-E1為研究對(duì)象，以10-5至10-2M LC干預(yù)MC3T3-E1。細(xì)胞凋亡E

2、LISA試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡。觀察GC誘導(dǎo)的MC3T3-E1凋亡時(shí)以10-6M地塞米松（Dex）誘導(dǎo)。Western blot分析法檢測(cè)Bcl-2、Bax和cytochrome c蛋白質(zhì)水平。酶底物法測(cè)定caspase-3和caspase-9活性。 （2）以21只7月齡雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠為研究對(duì)象，隨機(jī)分為對(duì)照組（7只）、激素造模組（GCT組）（7只）和LC干預(yù)組（LC組）（7只）。GCT組和LC組給予腹

3、腔注射甲基潑尼松龍3.5mg/kg/d，對(duì)照組給予腹腔注射等量蒸餾水。此外，LC組每日飲水中添加LC300mg/kg。12周后結(jié)束實(shí)驗(yàn)，取骨組織以雙能X線吸收法（DXA）測(cè)定大鼠腰椎（L3-L5）和左側(cè)股骨總BMD和總骨礦物質(zhì)含量（BMC）。顯微CT（μCT）測(cè)量大鼠左側(cè)脛骨松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)參數(shù)。 結(jié)果：（1）10-4至10-2M LC抑制MC3T3-E1細(xì)胞凋亡；10-4至10-2M LC降低無血清誘導(dǎo)的MC3T3-E1細(xì)胞cyt

4、ochrome c釋放和caspase-3，caspase-9活性；10-4至10-2M LC抑制Dex誘導(dǎo)的MC3T3-E1細(xì)胞凋亡。 （2）GCT組體重較對(duì)照組降低，LC組體重較GCT組增加，但低于對(duì)照組，無顯著差異。 GCT組左側(cè)股骨和腰椎（L3-L5）的離體BMD和BMC較對(duì)照組均顯著降低（P<0.05）。LC組左側(cè)股骨BMC、腰椎（L3-L5）BMD顯著高于GCT組（P<0.05）。 GCT組左側(cè)脛

5、骨骨小梁數(shù)量（Tb.N）、骨體積分?jǐn)?shù)（BVF）、體積骨密度（vBMD）和骨小梁聯(lián)接密度（Conn.D）與對(duì)照組相比均顯著降低，骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁間隔（Tb.Sp）顯著增高（P均<0.01），結(jié)構(gòu)模型指數(shù)（SMI）增高不明顯。LC組Tb.N、BVF和Conn.D較GCT組顯著增高（P均<0.01），Tb.Th（P<0.05）、Tb.Sp（P<0.01）顯著降低。 結(jié)論：（1）LC通過抑制cytochrome c釋放和