穩(wěn)定高表達(dá)和低表達(dá)GRβ的系膜細(xì)胞株的建立及其生物學(xué)特性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、 本文利用逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染技術(shù)，將重組的糖皮質(zhì)激素受體β(GRβ)正義和反義基因轉(zhuǎn)入大鼠腎小球系膜細(xì)胞，G418篩選陽(yáng)性克隆，利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和基因測(cè)序，驗(yàn)證插入hGRβ基因的正確性，采用Westemblot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)GRβ蛋白表達(dá)水平；通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)和MTT比色法檢測(cè)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)下的GRβ不同表達(dá)水平的腎小球系膜細(xì)胞增殖狀態(tài)、以及其對(duì)地塞米松抑制細(xì)胞增殖的反應(yīng)性，研究GRβ在糖皮質(zhì)激素效應(yīng)產(chǎn)

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