Id1-Id3在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生物學(xué)的作用.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2010級(jí)碩士學(xué)位論文Idl／Id3在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生物學(xué)的作用TheexpressionofIdl／Id3inendometrialcarcinomaandroleofIdl／Id3inbiologicalfunctionofendometrialcarcinomacell課題來(lái)源：廣東省自然科學(xué)基金No$2012010009351廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目No20078031001001學(xué)位申請(qǐng)導(dǎo)師姓專(zhuān)業(yè)名

2、培養(yǎng)類(lèi)培養(yǎng)層所在學(xué)人刊、麗麗名劉國(guó)炳主任醫(yī)師副教授稱(chēng)婦產(chǎn)科型專(zhuān)業(yè)學(xué)位次碩士院南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院2013年3月20日廣州摘要胞增殖或趨化相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，研究子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的浸潤(rùn)、增生及轉(zhuǎn)移的機(jī)制。重點(diǎn)探討雙敲低Idl／Id3基因?qū)ψ訉m內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖能力、侵襲能力、遷移能力及粘附能力的影響，闡明Idl；ld3基因在子宮內(nèi)膜癌生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移中的生物學(xué)作用，檢驗(yàn)干擾Idl／Id3是否可以有效治療子宮內(nèi)膜癌，為臨床診斷和治療提供理論依據(jù)?！狙芯糠椒?/p>

3、】1Westemblot檢測(cè)Idl、Id3在子宮內(nèi)膜癌組織內(nèi)表達(dá)：將隨機(jī)挑選的南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院婦產(chǎn)科2011年6月2011年10月住院手術(shù)的4例子宮內(nèi)膜癌患者新鮮組織及相應(yīng)的癌旁組織提取全蛋白，根據(jù)BCA蛋白定量試劑盒進(jìn)行定量，測(cè)定其在562nm處的吸收值(A562)。計(jì)算各濃度蛋白標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算回歸方程。提取的總蛋白，加入2xSDS蛋白上樣緩沖液(按1：1比例)，100℃煮沸5min，20。C保存?zhèn)溆?。Wes

4、ternblot方法檢測(cè)后觀察凝膠圖像，應(yīng)用AdobePhotoshop圖像軟件掃描Westernblot凝膠圖片，得到相應(yīng)灰度值，觀察4例子宮內(nèi)膜癌組織及相應(yīng)的癌旁組織中的Idl／Id3的表達(dá)。2qRTPCR檢測(cè)不同腺病毒載體感染子宮內(nèi)膜癌HEC1B和RL952細(xì)胞株后Idl、Id3、MMP2、CXCR4、P21mRNA水平：實(shí)驗(yàn)將兩株細(xì)胞各分為未處理細(xì)胞組(簡(jiǎn)寫(xiě)contr01)、空白病毒組(vector)、啟動(dòng)子病毒組(promot

5、er)、Idl／Id3雙敲低組(RNAi)。對(duì)四組細(xì)胞進(jìn)行提取RNA、去基因組、純度檢測(cè)和電泳檢測(cè)、逆轉(zhuǎn)錄及定量PCR操作。采用△△CT法對(duì)熒光定量PCR結(jié)果進(jìn)行定量分析，計(jì)算Idl／Id3雙敲低后MM2、CXCR4、P21的表達(dá)抑制率。3Westernblot檢測(cè)不同腺病毒載體感染子宮內(nèi)膜癌HEC1B和RL952細(xì)胞株后Idl、Id3、MMP2、CXCR4、P21蛋白表達(dá)量：對(duì)每株細(xì)胞的各四組細(xì)胞提取全蛋白，具體步驟同前。4噻唑藍(lán)(M