大鼠血管平滑肌鈣激活鉀通道蛋白表達(dá)的增齡性變化及PI3K抑制劑對(duì)通道蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：對(duì)不同年齡組及加入PI3K特異性抑制劑處理的大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞上鈣激活鉀通道的α單位蛋白表達(dá)水平進(jìn)行半定量分析，探討血管老化過程中鈣激活鉀通道α單位蛋白表達(dá)變化及其意義以及PI3K特異性抑制劑ILY294002對(duì)通道蛋白表達(dá)的影響。 方法：大鼠分為青年組5只(6～8月齡，體重250～300g)和老齡組5只(15～18月齡，體重250～300g)。取大鼠胸主動(dòng)脈用酶消化法(Ⅱ型膠原酶)做原代培養(yǎng)并傳代，提取2～3代細(xì)胞總

2、蛋白，青年組及老齡組2～3代細(xì)胞加入PI3K特異抑制劑LY29400抑制PI3K途徑，藥物作用72小時(shí)后提取細(xì)胞總蛋白，采用免疫印跡法檢測(cè)各組鈣激活鉀通道的α單位蛋白表達(dá)量，采用GDAPH作為內(nèi)參，以鈣激活鉀通道α單位蛋白條帶的光密度值與GDAPH條帶的光密度值之比來表示鈣激活鉀通道α單位蛋白表達(dá)量。 結(jié)果： 1.老齡組BKca α-亞單位與GDAPH相對(duì)光密度比值為0.32±0.06，青年組為0.80±0.15。老化組

3、與青年組相比結(jié)果有顯著性差異(P<0.05)，老年組為青年組的41％。 2．青年組加入LY294002前后BKca α-亞單位與GDAPH相對(duì)光密度比值為分別為0.80±0.15和0.41±0.08，加藥后為加藥前的51％，加藥后較加藥前顯著降低(P<0.05)。 3.老齡組加入LY294002前后的BKcaα-亞單位與GDAPH相對(duì)光密度比值為分別為0.32±0.06和0.14±0.05，加藥后為加藥前的43.75％，