點(diǎn)陣C02激光治療兔耳增生性瘢痕后成纖維細(xì)胞凋亡及VEGF變化規(guī)律的研究.pdf

1、目的：⑴通過點(diǎn)陣CO2激光對(duì)兔耳增生性瘢痕治療的實(shí)驗(yàn)研究，驗(yàn)證點(diǎn)陣CO2激光治療增生性瘢痕的有效性；⑵觀察點(diǎn)陣CO2激光治療兔耳增生性瘢痕后各時(shí)期瘢痕中成纖維細(xì)胞凋亡及VEGF表達(dá)情況的變化，為治療的有效性提供理論依據(jù)。
　　方法：①新西蘭大白兔20只制作兔耳增生性瘢痕的動(dòng)物模型。兔雙耳腹側(cè)局麻下每側(cè)作5個(gè)直徑為1cm的正方形切口，切口間距1cm，完整切除皮膚全層及軟骨膜，保留軟骨。創(chuàng)面予暴露、每日絡(luò)合碘換藥一次。三周內(nèi)創(chuàng)面上皮化

2、形成增生性瘢痕。②隨機(jī)將一側(cè)耳設(shè)定為點(diǎn)陣CO2激光治療組，對(duì)側(cè)設(shè)定為空白對(duì)照組。造模后三周治療組行點(diǎn)陣 CO2激光治療（DeepFX，能量20.0mJ頻率300Hz，Shape:2,Size:10,Pulses:2,Density:5％），對(duì)照組無任何干預(yù)。治療后創(chuàng)面不予特殊處理。③對(duì)照組、治療組切取治療后1小時(shí)、治療后3天、7天、14天、28天瘢痕組織，行HE染色觀察各組各時(shí)期鏡下成纖維細(xì)胞形態(tài)、密度，毛細(xì)血管增生情況及膠原纖維排列，

3、TUNEL法檢測成纖維細(xì)胞凋亡率變化，免疫組化檢測VEGF的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：⑴大體觀察：點(diǎn)陣CO2激光治療組較對(duì)照組瘢痕自治療后一周時(shí)間左右色澤變淡，突出皮面的增生塊軟化、變平,點(diǎn)陣CO2激光治療組瘢痕軟化、完全平坦所需時(shí)間是50.90±2.28天，對(duì)照組所需時(shí)間是69.00±2.10天。⑵HE染色組織學(xué)觀察：增生性瘢痕鏡下顯示瘢痕最厚部位為周邊正常皮膚厚度的3-4倍，主要是大量的成纖維細(xì)胞及不規(guī)則排列的膠原，其間見毛細(xì)血管

4、及炎性細(xì)胞，結(jié)構(gòu)近似人類的增生性瘢痕。從治療后14天開始，經(jīng)點(diǎn)陣CO2激光治療的瘢痕組織較同期對(duì)照組瘢痕中成纖維細(xì)胞明顯減少，膠原排列有序，毛細(xì)血管數(shù)量減少。⑶TUNEL檢測成纖維細(xì)胞凋亡：對(duì)照組在瘢痕形成的早期，僅有少量凋亡細(xì)胞，隨時(shí)間推移凋亡細(xì)胞逐漸增加；治療組治療后即刻即可在柱狀損傷帶周圍觀察到成纖維細(xì)胞凋亡增多現(xiàn)象，治療組治療后1小時(shí)、治療后3天、7天、14天、28天成纖維細(xì)胞凋亡率逐漸增高，各時(shí)期凋亡率均比同期對(duì)照組高（P＜0

5、.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑷血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達(dá)的變化：點(diǎn)陣 CO2激光治療后7天、14天、28天瘢痕中的VEGF陽性顆粒表達(dá)水平逐漸降低，與同期對(duì)照組比較明顯降低（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而對(duì)照組VEGF陽性顆粒表達(dá)水平在上皮化后28天時(shí)才開始顯著降低。
　　結(jié)論：①點(diǎn)陣CO2激光治療可以促進(jìn)兔耳增生性瘢痕軟化、變平。②點(diǎn)陣CO2激光治療兔耳增生性瘢痕后使瘢痕組織中成纖維細(xì)胞凋亡增加、VEGF的表達(dá)降低。