鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞系的生物學(xué)特性及多藥耐藥性檢測(cè).pdf

1、目的：對(duì)本實(shí)驗(yàn)室建立的人鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株(CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol)的生物學(xué)特性進(jìn)行觀察，檢測(cè)這兩株細(xì)胞系是否具有多藥耐藥性以及常見(jiàn)多藥耐藥基因MDR-1的表達(dá)情況。
　　 方法：采用大劑量沖擊和逐步增加劑量相結(jié)合的方法，建立了兩株鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株(CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol)，分別比較了這兩株耐藥細(xì)胞與其親本細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)曲線、倍增時(shí)間的差異；運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)了其細(xì)胞周

2、期變化；集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了它們對(duì)紫杉醇、順鉑、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤和博來(lái)霉素五種化療藥的敏感性；使用real time RT-PCR比較了親本細(xì)胞與耐藥細(xì)胞MDR-1表達(dá)差異。
　　 結(jié)果：兩株細(xì)胞系CNE-1/Taxol和HNE-2/Taxol的細(xì)胞大小及形態(tài)與親本細(xì)胞不一致，增殖速度減慢，倍增期延長(zhǎng)，G2/M期細(xì)胞比例增多。集落形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol對(duì)紫杉醇的敏感性顯著低于其親本細(xì)胞

3、CNE-1和HNE-2，前兩者的IC50值分別為9.59±0.26、7.62±0.21，而后兩者的IC50分別為1.14±0.08、0.92±0.08；同時(shí)，CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol對(duì)5-氟尿嘧啶和甲氨蝶呤的敏感性也顯著低于其親本細(xì)胞CNE-1和HNE-2，但耐藥指數(shù)顯著低于對(duì)紫杉醇的敏感性。然而，CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol對(duì)順鉑的敏感性顯著高于其親本細(xì)胞CNE-1和HNE-2，前兩者的IC50

4、值分別為95.4±9.2、158.3±5.6，后兩者的IC50值分別為239.2±10.7、187.6±4.5；與親本細(xì)胞系比較，耐藥細(xì)胞系對(duì)博萊霉素的敏感性沒(méi)有變化(p＞0.05)；定量RT-PCR的結(jié)果顯示MDR-1在兩株親本細(xì)胞中表達(dá)均很低，且在耐藥細(xì)胞中表達(dá)無(wú)明顯增高，反而降低。
　　 結(jié)論：CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol是兩株對(duì)紫杉醇耐藥的細(xì)胞株，是研究紫杉醇耐藥機(jī)制的重要實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?；兩株耐藥?xì)胞對(duì)5-氟