大鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在納米復(fù)合支架上的成骨向分化研究.pdf

1、目的：本課題旨在研究納米羥基磷灰石/聚酰胺66三維復(fù)合支架材料對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和成骨向分化的影響，了解其作為骨組織工程支架的優(yōu)勢和局限性，為其制備改進(jìn)和臨床應(yīng)用提供理論支持。 方法：原代分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，接種于該支架上。構(gòu)建簡易灌注式生物反應(yīng)器，以平面靜態(tài)培養(yǎng)為對照，在三維靜態(tài)和三維動態(tài)灌注兩種條件下礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞．支架復(fù)合體，在不同時點(diǎn)進(jìn)行掃描電鏡觀察和MTT、堿性磷酸酶活性、鈣素水平的定量測定。

2、 結(jié)果：靜態(tài)組和動態(tài)組的MTT曲線均保持穩(wěn)定緩慢上升而對照組在第9天以后呈下降趨勢；三組的堿性磷酸酶活性均在第7天達(dá)到峰值，動靜兩組區(qū)別不明顯；動態(tài)組在14、21天骨鈣素表達(dá)顯著高于靜態(tài)組，靜態(tài)組在7、14、21天骨鈣素水平又高于對照。掃描電鏡下，有別于靜態(tài)培養(yǎng)中覆蓋多孔表面的細(xì)胞毯，動態(tài)培養(yǎng)表現(xiàn)出空間板層狀的立體結(jié)構(gòu)。 結(jié)論：與二維平面培養(yǎng)相比，納米羥基磷灰石/聚酰胺66三維復(fù)合支架材料能在第9天與21天之間保持和促進(jìn)rBM