血必凈對膿毒癥肺損傷的作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：觀察血必凈對膿毒癥肺損傷大鼠早、晚期炎癥因子及纖溶抑制因子表達(dá)的影響，探討血必凈的抗炎作用、肺保護(hù)作用及其可能機(jī)制，為臨床肺損傷的治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：45 只成年雄性Wistar 大鼠隨機(jī)分為三組: 生理鹽水陰性對照組（NS 組）、模型組（LPS 組）、血必凈預(yù)處理組（XBJ 組），每組15 只。LPS 組和XBJ 組采用股靜脈注射LPS（5mg/kg）方法復(fù)制大鼠膿毒癥肺損傷模型，XBJ 組大鼠在制模前0.5

2、 小時經(jīng)股靜脈注射血必凈注射液4ml/kg，其余兩組予等容積生理鹽水。
　　 在造模后6h、12h、24h 各隨機(jī)處死大鼠5 只，分別作為6h、12h、24h 亞組，取大鼠肺組織、動脈血及血清待測。測定各組大鼠不同時間點動脈血氣分析；肺組織濕/干重比(W/D)；肺組織病理半定量評分；酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法測定血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）濃度；Real Time-PCR 法和IHC 法分別檢測肺組織HMGB1 及

3、PAI-1mRNA 和蛋白的表達(dá)，以及光鏡觀察肺組織的病理變化。
　　 結(jié)果：1.LPS 組均較NS 對照組表現(xiàn)為持續(xù)性低氧血癥，LPS 組大鼠肺組織病理半定量評分、W/D 隨著時間點的延長而增高，PaO2 隨著時間點的延長而下降，與NS 對照組同時間點比較，具有顯著性差異(P<0.05)；光鏡下見肺間質(zhì)滲出、水腫、大量炎癥細(xì)胞浸潤及紅細(xì)胞外滲等表現(xiàn)；2. XBJ 組較LPS 組光鏡下肺組織病理改變顯示肺損傷程度有所減輕，上述指

4、標(biāo)均顯著優(yōu)于LPS 組同時間點（P＜0.05）；3.與NS 組比較， LPS 組大鼠致炎后6h 時血清中TNF-α的蛋白表達(dá)明顯升高，同時XBJ 組的TNF-α蛋白表達(dá)則較LPS 組明顯下降（P＜0.05）。4. 在造模后LPS 組隨著實驗時間的延長，肺組織HMGB1 蛋白和mRNA 的表達(dá)呈逐漸增加趨勢，至24 小時達(dá)到高峰。免疫組織化學(xué)檢測HMGB1 強(qiáng)陽性表達(dá)，主要分布于肺泡上皮和間質(zhì)上皮細(xì)胞、小支氣管粘膜上皮細(xì)胞、肺泡和間質(zhì)大量

5、的炎性細(xì)胞；與LPS 組相比，XBJ 組在造模后同時間點肺組織HMGB1 蛋白和mRNA 表達(dá)明顯降低(P＜0．05)；5. 在造模后LPS 組隨著實驗時間的延長，肺組織PAI-1 蛋白和mRNA 的表達(dá)逐漸增加，至12 小時達(dá)到高峰。免疫組織化學(xué)檢測PAI-1 隨著肺損傷的加重，肺泡上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞胞漿均有陽性表達(dá)，以12h 為最強(qiáng)，但24h 時間點仍見較強(qiáng)陽性表達(dá)。與LPS 組相比，XBJ 組在造模后同

6、時間點肺組織PAI-1 蛋白和mRNA 表達(dá)明顯降低（P＜0.05）。
　　 結(jié)論：采用股靜脈注射LPS可以成功建立大鼠膿毒癥肺損傷模型。血必凈預(yù)處理可以使LPS誘導(dǎo)的ALI大鼠的肺組織水腫和炎癥細(xì)胞浸潤的程度減輕，改善血氧指標(biāo)和肺組織病理形態(tài)半定量評分，表明血必凈具有明確的抗炎、促纖溶及肺保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抑制早、晚期炎癥因子TNF-α及HMGB1從而抑制過度的炎癥反應(yīng)，同時抑制纖溶抑制因子PAI-1從而抑制過度的抗纖溶反