人消化系統(tǒng)細(xì)胞系L02、HepG2、SGC7901、SW480中SCF的表達(dá)及其與腫瘤關(guān)系的研究.pdf

1、目的：以L(fǎng)02、HepG2、SGC7901、SW480四種細(xì)胞為研究對(duì)象，在基因和蛋白質(zhì)水平檢測(cè)干細(xì)胞因子（Stem Cell Factor，SCF）在四種細(xì)胞中是否表達(dá)及其表達(dá)水平。通過(guò)比較L02和HepG2中SCF表達(dá)水平，探討SCF與肝癌發(fā)生的關(guān)系；通過(guò)比較SGC7901、SW480、HepG2抑制組和非抑制組中SCF表達(dá)水平的差異，探討SCF與胃癌、結(jié)腸癌、肝癌的關(guān)系，闡明SCF在消化系統(tǒng)腫瘤發(fā)生中的作用。 方法：采用M

2、TT方法篩選藥物半數(shù)抑制濃度（IC50），以1/2IC50作為實(shí)驗(yàn)用藥物濃度。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的L02、HepG2、SGC7901、SW480細(xì)胞，采用RT-PCR和Western blotting方法分別檢測(cè)四種細(xì)胞中SCFmRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)情況：分別取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的L02、HepG2、SGC7901、SW480細(xì)胞培養(yǎng)24h后隨機(jī)分為抑制組和非抑制組。抑制組在含1/21C50的CDDP培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)24h，非抑制組在不含CDDP的培養(yǎng)

3、液中繼續(xù)培養(yǎng)24h。采用RT-PCR方法檢測(cè)SCF的mRNA表達(dá)量，用Western Blotting方法檢測(cè)SCF蛋白質(zhì)表達(dá)水平，探討SCF與消化系統(tǒng)腫瘤發(fā)生的關(guān)系。 結(jié)果：CDDP對(duì)L02、HepG2、SGC7901、SW480四種細(xì)胞作用的IC50值分別為76.7±0.4μmol/L，40.6±0.6μmol/L，54.8±0.2μmol/L和66.9±0.2μmol/L。L02、HepG2、SGC7901和SW480細(xì)胞

4、均有SCF表達(dá)，其mRNA表達(dá)量依次是0.767±0.012，0.617±0.038，0.589±0.087，0.546±0.077：蛋白質(zhì)表達(dá)量分別是0.905±0.005，0.713±0.060，0.353±0.055，0.606±0.165。CDDP抑制后四種細(xì)胞的SCF mRNA表達(dá)量依次是0.484±0.005，0.250±0.080，0.401±0.065，0.167±0.025；蛋白質(zhì)表達(dá)量分別是0.630±0.013，0

5、.440±0.115，0.293±0.072，0.317±0.046。L02和HepG2細(xì)胞抑制組的SCF mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)量均低于非抑制組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；HepG2細(xì)胞非抑制組SCF mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)量與L02非抑制組比較均減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在SGC7901、SW480和HepG2三種細(xì)胞抑制組中SCFmRNA表達(dá)量均較非抑制組減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。SGC7901細(xì)

6、胞抑制組SCF蛋白質(zhì)表達(dá)量與非抑制組比較雖顯示數(shù)量減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；SW480、HepG2細(xì)胞抑制組SCF蛋白質(zhì)表達(dá)量與非抑制組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論：SCF在L02、HepG2、SGC7901和SW480四種細(xì)胞中均有表達(dá)。在L02細(xì)胞中SCF mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平比HepG2高，說(shuō)明胚胎時(shí)期肝細(xì)胞表達(dá)的SCF處于高水平；CDDP抑制L02、HepG2細(xì)胞增殖后，兩種細(xì)胞中SC

7、F mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)均下調(diào)，提示肝組織癌變后SCF表達(dá)量可能下調(diào)，SCF可能與肝癌發(fā)生有關(guān)。CDDP抑制SGC7901、SW480和HepG2細(xì)胞增殖后，SCF mRNA在三種細(xì)胞中表達(dá)量均下調(diào)；SCF蛋白質(zhì)表達(dá)量也都下降，除SGC7901外，其他組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明SCF在促進(jìn)結(jié)腸癌、肝癌細(xì)胞增殖方面有一定作用，推測(cè)消化系統(tǒng)胃、結(jié)腸、肝組織發(fā)生癌變時(shí)SCF表達(dá)水平會(huì)升高，檢測(cè)細(xì)胞中SCF基因和蛋白質(zhì)表達(dá)量可以