2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、目的：IDO可通過降解局部組織中的色氨酸來調(diào)節(jié)T細胞免疫，從而介導(dǎo)腫瘤的免疫逃逸。建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染IDO基因的HepG2細胞系，以探索及研究該基因的功能，為進一步研究IDO基因在肝癌免疫逃逸中的作用奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：進行預(yù)實驗制定合適的G418篩選濃度、維持濃度，應(yīng)用脂質(zhì)體將真核細胞表達質(zhì)粒pcDNA3.1-IDO和空載質(zhì)粒pcDNA3.1轉(zhuǎn)染入HepG2細胞，經(jīng)G418進行篩選后，挑取單克隆進行培養(yǎng)，用逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(yīng)(

2、RT-PCR)和Westernblot方法驗證獲得的表達細胞株。
　　 結(jié)果：預(yù)實驗篩選濃度確定為800ug/ml，維持濃度為400ug/ml；RT-PCR檢測顯示：pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組成功擴增出464bp的目的基因片段，pcDNA3.1轉(zhuǎn)染組及未轉(zhuǎn)染組未能擴增出片段；WesternBlot檢測顯示，質(zhì)粒pcDNA3.1-IDO穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的HepG2細胞表達IDO蛋白，而質(zhì)粒pcDNA3.1穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HepG2細胞與未轉(zhuǎn)染

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