干細(xì)胞樣骨肉瘤細(xì)胞的分選與其生物學(xué)特性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本研究針對(duì)骨肉瘤的高復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移特性，從普通骨肉瘤細(xì)胞株中分離、培養(yǎng)骨肉瘤干細(xì)胞，檢測(cè)骨肉瘤干細(xì)胞的生物學(xué)特性，為進(jìn)一步研究骨肉瘤發(fā)病機(jī)制、早期診斷及靶向治療提供依據(jù)。
　　 方法:從中科院上海細(xì)胞庫(kù)購(gòu)買骨肉瘤MG-63細(xì)胞株，進(jìn)行大量的增殖培養(yǎng)，采用添加低濃度甲氨蝶呤的無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù)誘導(dǎo)骨肉瘤球體細(xì)胞;從細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，成骨與成脂誘導(dǎo)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)其細(xì)胞表面標(biāo)志物來(lái)檢測(cè)其生物學(xué)特性。
　　 結(jié)果:
　　

2、(1)骨肉瘤MG-63細(xì)胞株傳代并大量增殖。
　　 (2)成功從第三代骨肉瘤細(xì)胞誘導(dǎo)出干細(xì)胞樣骨肉瘤球（以下簡(jiǎn)稱M細(xì)胞）。
　　 (3)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)M細(xì)胞中CD29、90、45的表達(dá)，CD29陽(yáng)性率為99.0％，CD90陽(yáng)性率為99.6％，CD45陽(yáng)性率為1.19％。
　　 (4)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞分化實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)M細(xì)胞具有較強(qiáng)的侵襲性、增殖能力。
　　 結(jié)論:骨肉瘤MG-63細(xì)胞在添加細(xì)