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1、目的: 探討環(huán)氧化酶-2(COX-2)選擇性抑制劑塞來昔布(celecoxib)對(duì)雄激素非依賴性人前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3中VEGfF-C mRNA及bcl-2 mRNA表達(dá)的影響,研究COX-2抑制劑抗腫瘤的作用機(jī)制。為臨床治療治療前列腺癌,特別是雄激素非依賴性前列腺癌提供新的方法和理論依據(jù)。 方法: 常規(guī)培養(yǎng)PC-3細(xì)胞株,取第三代對(duì)數(shù)生長的細(xì)胞,用0.25%的胰蛋白酶消化。將培養(yǎng)的PC-3細(xì)胞分為四組:試驗(yàn)組(分別以10μm
2、ol/L、20μmol/L、40μmol/L不同濃度塞來昔布處理)和對(duì)照組。在相同條件下接種于96孔培養(yǎng)板繼續(xù)培養(yǎng)72小時(shí),收集細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。通過光學(xué)顯微鏡觀察塞來昔布處理后培養(yǎng)的PC-3細(xì)胞生長和形態(tài)變化。通過MTT法了解不同濃度塞來昔布作用后PC-3細(xì)胞的生長抑制曲線。采用RT-PCR的方法檢測(cè)四組中VEGF-C及bcl-2 mRNA的表達(dá)。用凝膠圖像分析系統(tǒng)對(duì)VEGF-C和Bcl-2 mRNA的表達(dá)量進(jìn)行分析。 結(jié)果:
3、 經(jīng)40μmol/L塞來昔布處理的PC-3細(xì)胞生長明顯受到抑制。10μmol/L塞來昔布組VEGF-C/GAPDH值及bcl-2/GAPDH值分別為0.509±0.057、0.444±0.034,與對(duì)照組相比差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);20μmol/L及40μmol/L 塞來昔布組VEGF-C/GAPDH值分別為0.370±0.063、0.263±0.062,bcl-2/GAPDH值分別為0.339±0.047、0.272±0.
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