頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞與牙周膜干細(xì)胞的生物學(xué)特性比較.pdf

1、牙周病(periodontal disease)是一種累及牙骨質(zhì)、牙周膜和牙槽骨的慢性破壞性疾病，是造成成人牙齒脫落的主要病因。目前，組織工程是實(shí)現(xiàn)牙周再生最理想的方式。它包括三方面要素：種子細(xì)胞、支架材料和生長(zhǎng)因子。合理選擇種子細(xì)胞是其成功的關(guān)鍵。牙周膜干細(xì)胞(PDLSCs)是目前公認(rèn)的牙周組織再生最佳來(lái)源細(xì)胞,一定條件下可以構(gòu)建功能性牙周膜。但是，健康的牙周膜細(xì)胞需拔牙后分離培養(yǎng)獲取，限制了其臨床應(yīng)用。因此，尋找其它種子細(xì)胞源也一直

2、是國(guó)際相關(guān)熱點(diǎn)之一。大量的研究表明，來(lái)源于頜骨的骨髓基質(zhì)細(xì)胞具有旺盛的增殖能力和優(yōu)于髂骨來(lái)源的骨髓基質(zhì)細(xì)胞的成骨特性。我們通過(guò)頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞(OF-MSCs)與牙周膜干細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)外比較，初步研究頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)特性，探討其用于牙周組織再生的可行性。本實(shí)驗(yàn)中通過(guò)頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞和牙周膜干細(xì)胞的原代培養(yǎng)，觀(guān)察細(xì)胞外形及克隆形成情況；CCK-8測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)；免疫熒光染色檢測(cè)STR0-1、CD146表達(dá)；定向誘導(dǎo)后檢測(cè)脂滴形成及堿

3、性磷酸酶活性變化情況，RT-PCR方法檢測(cè)7、14d成骨相關(guān)基因的表達(dá)情況；掃描電鏡觀(guān)察兩種細(xì)胞在HA/β-TCP材料表面的黏附、伸展情況，并植入裸鼠皮下(n=4)，8周后取材行組織學(xué)觀(guān)察來(lái)評(píng)價(jià)兩種細(xì)胞的成骨能力。
　　結(jié)果：
　　1、頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞和牙周膜干細(xì)胞體外原代培養(yǎng)均能貼壁生長(zhǎng)，呈成纖維樣細(xì)胞外形；頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞具有較強(qiáng)克隆形成能力；生長(zhǎng)曲線(xiàn)顯示兩種細(xì)胞生長(zhǎng)趨勢(shì)相似，頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞在6d左右基本進(jìn)入平臺(tái)期，牙

4、周膜干細(xì)胞仍呈緩慢增長(zhǎng)趨勢(shì)；兩種細(xì)胞均表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)志STR0-1和血管旁標(biāo)志CD146。
　　2、兩種細(xì)胞經(jīng)成脂誘導(dǎo)14d，油紅O染色可見(jiàn)脂滴形成；成骨誘導(dǎo)后RT-PCR均能檢測(cè)到兩種細(xì)胞均有成骨相關(guān)基因(OCN、OPN、ALP、runX2、BMP-2)的表達(dá)，其中OCN、OPN兩種基因在頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)較早、較強(qiáng)。
　　3、在非誘導(dǎo)條件下，頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞表現(xiàn)和牙周膜干細(xì)胞表現(xiàn)較低水平堿性磷酸酶活性，頜骨骨

5、髓基質(zhì)細(xì)胞稍強(qiáng)；在成骨誘導(dǎo)條件下，頜骨骨髓基質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞堿性磷酸酶活性明顯較牙周膜干細(xì)胞強(qiáng)。
　　4、掃描電鏡觀(guān)察，兩種細(xì)胞均可在HA/β-TCP材料表面黏附、伸展良好。
　　5、植入裸鼠皮下8周，兩種細(xì)胞可在HA/β-TCP表面形成類(lèi)骨質(zhì)樣結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)論：頜骨骨髓基質(zhì)細(xì)胞與牙周膜干細(xì)胞表現(xiàn)相似，均具有間充質(zhì)干細(xì)胞的一般特性，具有一定的體內(nèi)成骨潛能，但體外具有比牙周膜干細(xì)胞更強(qiáng)的成骨向分化能力。其在牙周組織缺損修復(fù)中發(fā)