十八碳不飽和脂肪酸對(duì)乳腺上皮細(xì)胞脂肪代謝的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、脂肪酸是乳脂的重要組成部分，乳中脂肪酸合成與轉(zhuǎn)運(yùn)的最直接元件就是乳腺上皮細(xì)胞。本試驗(yàn)以奶牛乳腺上皮細(xì)胞為模型，研究十八碳不飽和脂肪酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞脂肪代謝的影響及其機(jī)制。
　　向奶牛乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)液里添加油酸、亞油酸、亞麻酸，應(yīng)用MTT法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞增殖的影響，油紅 O染色法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)甘油三脂含量以及利用定量PCR方法檢測(cè)相關(guān)脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體，脂肪合成關(guān)鍵酶mRNA轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果顯示油酸在50～400μm/L范圍內(nèi)隨著濃度的增

2、加，對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用越強(qiáng)，較高濃度的油酸(800μm/L)會(huì)抑制細(xì)胞增殖。亞油酸在25～100μm/L范圍內(nèi)隨著濃度的增加，對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用越強(qiáng)，高濃度(200μm/L)顯著抑制細(xì)胞增殖。(0.5～1μm/L)的亞麻酸促進(jìn)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖，較高濃度的亞麻酸(2～8μm/L)會(huì)抑制細(xì)胞增殖。三種脂肪酸均能促進(jìn)細(xì)胞甘油三酯的沉積，且油酸在400μm/L、亞油酸100μm/L、亞麻酸2μm/L時(shí)促進(jìn)作用顯著

3、。外源添加油酸對(duì)CD36 mRNA轉(zhuǎn)錄水平?jīng)]有顯著影響，而較高添加濃度的油酸顯著抑制轉(zhuǎn)運(yùn)基因FABP3的轉(zhuǎn)錄(P<0.01)。外源添加油酸對(duì)FA合成關(guān)鍵基因ACACA，以及去飽和酶基因SCD mRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響具有劑量效應(yīng)，高濃度(200、400、800μmol/L)會(huì)顯著降低 ACACA、SCD的mRNA轉(zhuǎn)錄水平(P<0.01)，其中對(duì) SCD的影響最為顯著；而添加50μmol/L油酸促進(jìn)細(xì)胞PPARGmRNA的表達(dá)，更高濃度的油