多不飽和脂肪酸對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞白色脂肪棕色化的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　肥胖及其相關(guān)代謝紊亂疾病問(wèn)題日益突出，目前缺少行之有效的減肥方法。人體內(nèi)的棕色脂肪組織因?yàn)榭梢源龠M(jìn)能量代謝，調(diào)節(jié)葡萄糖和脂質(zhì)水平，成為研究熱點(diǎn)。n-3和n-6多不飽和脂肪酸(PUFAs)能夠調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞分化和功能，改善肥胖。本研究旨在采用n-3系的二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA)、二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid，EPA)，以及n-6系的花生四烯酸(Arachi

2、donicacid，AA)處理各個(gè)階段的3T3-L1脂肪細(xì)胞，觀察其糖脂水平與棕色化相關(guān)標(biāo)志基因的表達(dá)，以及線粒體數(shù)量變化，探討n-3、n-6兩類(lèi)多不飽和脂肪酸對(duì)白色脂肪的棕色化作用及機(jī)制。
　　方法:
　　采用濃度為10μM和100μM的DHA、EPA、AA分別處理3T3-L1各階段的脂肪細(xì)胞。用試劑盒檢測(cè)葡萄糖消耗量與甘油三酯水平，用Q-PCR和蛋白免疫印跡法檢測(cè)棕色化標(biāo)記基因的mRNA與蛋白表達(dá)量，Q-PCR和Mito

3、-Tracker Green染色法檢測(cè)線粒體含量。
　　結(jié)果:
　　DHA處理3T3-L1前脂肪細(xì)胞2天后，出現(xiàn)了白色脂肪棕色化的細(xì)胞表征。DHA和EPA處理處于分化階段的3T3-L1脂肪細(xì)胞8天后，棕色脂肪標(biāo)志性基因UCP1蛋白表達(dá)量顯著增加，線粒體含量和葡萄糖消耗量增加。100μM作用濃度下，DHA處理組的3T3-L1脂肪細(xì)胞甘油三酯水平下降，EPA處理組的細(xì)胞甘油三酯水平升高。EPA和AA處理已經(jīng)完全分化成熟的脂肪細(xì)胞