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文檔簡介
1、淋巴細(xì)胞亞群免疫表型與臨床,,,主要內(nèi)容,概念各類淋巴細(xì)胞的基礎(chǔ)知識淋巴細(xì)胞亞群檢測的臨床意義,一、概念,淋巴細(xì)胞 屬白細(xì)胞的一種,由淋巴器官產(chǎn)生,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。淋巴細(xì)胞的免疫表型 淋巴細(xì)胞的膜表面分子(分化群抗原 CD)可用于鑒定和區(qū)分其亞群和亞類,是研究淋巴細(xì)胞的重要工具。淋巴細(xì)胞亞群 按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同,可分為T細(xì)胞、B細(xì)胞和自然殺傷(NK)細(xì)胞。淋巴細(xì)胞
2、的免疫表型 淋巴細(xì)胞的膜表面分子(分化群抗原 CD)可用于鑒定和區(qū)分其亞群和亞類,是研究淋巴細(xì)胞的重要工具。,淋巴亞群在外周血中的比例(%淋巴細(xì)胞),T淋巴細(xì)胞 50-84%NK細(xì)胞 7-40%B淋巴細(xì)胞 5-18%,各類淋巴細(xì)胞的基礎(chǔ)知識,,T淋巴細(xì)胞,,,概念 來源于骨髓的淋巴樣干細(xì)胞,在胸腺中成熟的淋巴細(xì)胞,故稱胸腺依賴性淋巴細(xì)胞(thymus-dependentlymphocyte),
3、簡稱T細(xì)胞。功能 負(fù)責(zé)細(xì)胞免疫功能,參與抗腫瘤、抗細(xì)胞內(nèi)感染微生物、移植排斥、遲發(fā)型超敏反應(yīng);對部分體液免疫發(fā)揮輔助功能。免疫表型:CD3,與TCR形成復(fù)合體,是T細(xì)胞識別抗原和轉(zhuǎn)導(dǎo)信號的主要單位。 CD3+/CD4+:輔助性T細(xì)胞 CD3+/CD8+:殺傷性T細(xì)胞,T淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育,T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育,T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育,三個(gè)階段雙陰性階段 (DN)雙陽性
4、階段 (DP)單陽性階段 (SP)三個(gè)重要事件TCR基因重排陽性選擇陰性選擇三個(gè)重要結(jié)果獲得功能性TCR獲得MHC限制性獲得自身耐受,T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育,初始T細(xì)胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依賴區(qū)T細(xì)胞在外周淋巴器官與抗原接觸后,最終分化為具有不同效應(yīng)功能的T細(xì)胞亞群,效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞。,T淋巴細(xì)胞亞群,按T細(xì)胞所處的活化階段 初始T細(xì)胞(naive T cell)
5、 效應(yīng)T細(xì)胞(effector T cell) 記憶性T細(xì)胞(memory T cell)按TCR的表型分類 TCR?? + T細(xì)胞 TCR?? + T細(xì)胞,按T細(xì)胞的CD4和CD8分子表型 CD4+ T細(xì)胞 輔助T細(xì)胞 CD8+ T細(xì)胞 殺傷T細(xì)胞 按T細(xì)胞的功能分類 Th(help T cell)
6、 Tc/C TL(cytotoxic T cell) Tr(regulatory T cell),初始T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞,初始T細(xì)胞表型:CD45RA+、 CD62L+、CD25-(IL-2R)特點(diǎn):未接觸抗原的成熟T細(xì)胞,有分化潛能效應(yīng)T細(xì)胞表型: CD4+、CD8+遷往炎癥部位,執(zhí)行細(xì)胞免疫效應(yīng)記憶性T細(xì)胞表型:CD45RO+、CD25+(IL-2R)特點(diǎn):存活期長,再次接受抗原刺激
7、后可迅速活化,TCRαβT細(xì)胞和TCRγδT細(xì)胞,TCRγδT細(xì)胞數(shù)量少,占5%多為CD4―CD8―(DN細(xì)胞);少數(shù)為CD8+分布于皮膚、粘膜參與固有免疫,是抗感染的第一線細(xì)胞TCRαβT細(xì)胞數(shù)量多,CD4+或CD8+(SP細(xì)胞)TCR識別譜廣,是參與免疫應(yīng)答的主要細(xì)胞群,,Th、CTL、Ts和Treg細(xì)胞,輔助性T細(xì)胞(Th) 主要表面標(biāo)記:CD4+CD8- 主要種類:TH1,TH2 功能:具
8、有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答(促進(jìn)和抑制)的作用細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL) 主要表面標(biāo)記:CD4-CD8+CD28+ 功能:特異性直接殺傷靶細(xì)胞 殺傷機(jī)制: 釋放穿孔素,顆粒酶殺傷靶細(xì)胞 通過Fasl介導(dǎo)靶細(xì)胞的凋亡,,抑制性T細(xì)胞(Ts) 主要表面標(biāo)志:CD4-CD8+CD28- 功能:對免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能,抑制性T細(xì)胞功能的異常,常與T自身免疫
9、性疾病、第I型超敏反應(yīng)等疾病發(fā)生有關(guān)。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg) 主要表面標(biāo)記:CD4+CD25+ 功能:抑制免疫應(yīng)答,小結(jié),NK淋巴細(xì)胞,,NK細(xì)胞:一種大顆粒淋巴細(xì)胞。英文全稱為“natural killer cell”,也稱作“自然殺傷細(xì)胞”。 它是一種能直接殺傷靶細(xì)胞效應(yīng)的特殊的淋巴細(xì)胞系,具有抗腫瘤抗感染免疫調(diào)節(jié)的功能,且表現(xiàn)為速發(fā)效應(yīng)。在醫(yī)學(xué)上被稱作是“人體抵抗癌細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的第一道防線”。,
10、NK細(xì)胞的表型,NK細(xì)胞表面標(biāo)志物:CD3-/CD16+CD56+與T細(xì)胞、B細(xì)胞相比,NK細(xì)胞表面標(biāo)志的特異性是相對的。人NK細(xì)胞mIg-,部分NK細(xì)胞CD2、CD3和CD8陽性,表達(dá)IL-2受體β鏈(P75,CD122),CD11b/CD18陽性。,細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(CIK),CIK(cytokine-induced Killer)細(xì)胞是由r-IFN、CD3-Ab、IL-1、IL-2等細(xì)胞因子在體外誘導(dǎo)并大量擴(kuò)增的具有殺傷腫瘤
11、活性的細(xì)胞,是一種新型、高效、廣譜的免疫細(xì)胞,是目前最新的腫瘤免疫治療手段。CIK細(xì)胞:CD3+T細(xì)胞為主的異質(zhì)性細(xì)胞群體,同時(shí)表達(dá)CD3、CD56,兼CTL強(qiáng)大的抗瘤活性,和NK細(xì)胞非MHC限制性殺瘤特點(diǎn),目前所知?dú)钚宰顝?qiáng)的免疫效應(yīng)細(xì)胞。,,CIK的表型及起源:表型: CD3+CD56+和CD3-CD56-兩個(gè)亞群,主要效應(yīng)細(xì)胞CD3+CD56+。分布:優(yōu)先分布肝臟,CD3+CD56+占肝臟CD3細(xì)胞的1/3,其次外周血
12、,占1-5%。來源:主要是CD3+CD56-的T細(xì)胞,多數(shù)是CD4-CD8 + 及CD4-CD8-。,B淋巴細(xì)胞,,B淋巴細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中的抗體產(chǎn)生細(xì)胞。產(chǎn)生的抗體可與抗原起特異性的結(jié)合,如中和細(xì)菌的外毒素使其失去毒性作用;抗體與抗原結(jié)合后形成的復(fù)合物易被吞噬細(xì)胞清除;抗體與抗原結(jié)合后再結(jié)合補(bǔ)體清除病原體。B細(xì)胞特異性標(biāo)志物:CD19、CD20等B淋巴細(xì)胞檢測時(shí),多用CD3-CD19+來作為檢測標(biāo)志。,B細(xì)胞的亞群,周圍
13、淋巴器官中的B細(xì)胞具有異質(zhì)性可依據(jù)CD5是否表達(dá)分為B1和B2兩亞群,淋 巴 細(xì) 胞 亞 群 與 臨 床,,淋巴細(xì)胞亞群的檢測內(nèi)容,,目前常做以下項(xiàng)目的檢測,淋巴細(xì)胞亞群分析T細(xì)胞亞群分析T淋巴細(xì)胞(CD3+)輔助T細(xì)胞(CD3+CD4+)殺傷/抑制T細(xì)胞(CD3+CD8+)CD4+/CD8+的比值B細(xì)胞(CD3+CD19+)NK細(xì)胞(CD3-CD16+56+)活化淋巴細(xì)胞的檢測,TBNK檢測的適用人群,腫瘤病人化療過
14、程中,抗癌藥物對同樣處于增殖狀態(tài)的、對腫瘤敏感的活化淋巴細(xì)胞也有殺傷作用,甚至免疫功能嚴(yán)重?fù)p毀?;顒悠诘淖陨砻庖卟』颊?,必然表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞亞群絕對值和活化淋巴細(xì)胞百分比的明顯異常。懷疑有免疫缺陷的病人器官移植患者術(shù)后監(jiān)測中更具有不可或缺的作用……,淋巴細(xì)胞亞群的正常參考值(%淋巴細(xì)胞群),,,,,,,NK細(xì)胞,,,CIK細(xì)胞,,B細(xì)胞,淋巴細(xì)胞亞群的臨床意義,,,淋巴細(xì)胞亞群分析是檢測細(xì)胞免疫和體液免疫功能的重要指標(biāo),它總體反映機(jī)
15、體當(dāng)前的免疫功能、狀態(tài)和平衡水平,并可以輔助診斷某些疾?。ㄈ缱陨砻庖卟?、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態(tài)反應(yīng)性疾病等),分析發(fā)病機(jī)制,觀察療效及檢測預(yù)后有重要意義 。當(dāng)某種細(xì)胞亞群所占百分比過高或過低,都提示存在免疫功能紊亂,但一般情況下對疾病的診斷和鑒別無特異性。,淋巴細(xì)胞亞群測定的結(jié)果解釋,T細(xì)胞異常 CD4細(xì)胞異常 CD8細(xì)胞異常 CD4/CD8比值異常 B細(xì)胞異常 NK細(xì)胞異常,,總T、總B、NK細(xì)胞可以用來判斷某
16、些免疫缺陷和自身免疫性疾病,也可以用于監(jiān)測移植后得免疫重建。,T細(xì)胞減少,見于先天性免疫缺陷病(例如DiGeorge綜合癥,胸腺發(fā)不發(fā)育)以及腎臟和心臟移植后接受預(yù)防排斥的免疫調(diào)節(jié)藥物OKT-3的患者也常見于惡性腫瘤、自身免疫性疾?。⊿LE和RA等)、先天性免疫缺陷病、艾滋病、接受放療、化療或者使用腎上腺皮質(zhì)激素等免疫抑制劑資料的患者。,T細(xì)胞增多,見于慢性活動性肝炎、重癥肌無力等自身免疫病活動期,,CD4淋巴細(xì)胞減少:見于惡性腫瘤
17、、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑患者。CD4淋巴細(xì)胞增加:可能有過強(qiáng)的細(xì)胞免疫反應(yīng);或某些免疫增強(qiáng)藥物的有效結(jié)果。 CD8淋巴細(xì)胞增多:見于自身免疫性疾病,如SLE、艾滋病初期、慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等。CD8淋巴細(xì)胞減少:見于機(jī)體對各種病毒感染的免疫反應(yīng);腫瘤患者具有抗腫瘤免疫反應(yīng)時(shí) 。CD8細(xì)胞與CD4細(xì)胞同時(shí)減少:見于各種嚴(yán)重的免疫缺陷以及腫瘤患者晚期或免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p傷后。,CD4/CD8比值異常,CD4
18、/CD8>2.5表明細(xì)胞免疫功能處于“過度活躍”狀態(tài),容易出現(xiàn)自體免疫反應(yīng),見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、I型糖尿病等。CD4/CD8<1.0稱為“免疫抑制”狀態(tài),常見于(1)免疫缺陷病,如艾滋病時(shí)的比值常顯著小于0.5;(2)惡性腫瘤,當(dāng)發(fā)生癌轉(zhuǎn)移時(shí),CD3 、CD4 細(xì)胞數(shù)明顯減少的同時(shí)CD8 細(xì)胞數(shù)明顯增多,CD4/ CD8 比值明顯降低,提示惡性腫瘤患者晚期細(xì)胞免疫功能更低,預(yù)后更差 ;(3)再生障礙性貧血、白血?。唬?)某些病毒感染;
19、CD4/CD8降到1.0以下為“倒置”,是較為明顯的異常;(5)用于器官移植后監(jiān)測機(jī)體的免疫狀態(tài)、用藥劑量的調(diào)整、抑制排斥反應(yīng)的發(fā)生。若移植后CD4/CD8較移植前明顯增加,則可能發(fā)生排斥反應(yīng)。比值持續(xù)減低表明移植后感染,若比值<0.2時(shí)應(yīng)停用免疫抑制劑,以免繼發(fā)嚴(yán)重感染而導(dǎo)致移植失敗。注意分清主要是CD8細(xì)胞增多還是CD4減少,B細(xì)胞的異常,B細(xì)胞明顯增加:見于淋巴組織增生失調(diào)(例如慢性淋巴細(xì)胞白血?。?,也見于病毒感染早期。
20、 B細(xì)胞缺如:見于原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病(如性聯(lián)無丙種球蛋白血癥)和重癥聯(lián)合免疫缺陷(T細(xì)胞同時(shí)缺如);體液免疫功能不良者則減少;在生命垂危時(shí)可呈現(xiàn)極度減少,NK細(xì)胞異常,NK細(xì)胞增多:見于病毒感染,腫瘤早期患者(尚有抗腫瘤免疫反應(yīng)時(shí))NK細(xì)胞減少:免疫功能低下,免疫抑制藥物使用后,腫瘤晚期,活化淋巴細(xì)胞的檢測(CD69/HLA-DR/CD71) 活化淋巴細(xì)胞的標(biāo)志有CD25 (IL-2R),CD69,CD71,CD38,CD95
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