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文檔簡介
1、目的:論證MDSC受TGF-β1刺激產(chǎn)生CTGF的過程中,Erk途徑和p38 途徑是否發(fā)揮作用。
方法:采用細胞差速貼壁法,從新生大鼠骨骼肌中分離MDSC,進行細胞表型鑒定后傳代培養(yǎng)。設(shè)置空白對照組A組、陰性對照組B組、三組不同濃度(20、40、80μM)的Erk1/2 特異性阻斷劑PD98059實驗組C、D、E組,以及三組不同濃度(0.2、0.5、1.0μM)的p38 特異性阻斷劑SB203580實驗組F、G、H組。將大
2、鼠MDSC分別使用PD98059和SB203580 預(yù)處理后,再用TGF-β1進行刺激,然后進行Real Time-PCR和Western Blot,檢測細胞中CTGF mRNA和蛋白質(zhì)的水平。
結(jié)果:A~H組CTGF mRNA表達水平相對值分別為:0.552±0.150、3.436±0.207、2.583±0.253、2.212±0.315、1.533±0.382、3.514±0.453、3.412±0.311、3.67
3、4±0.310;A~H組CTGF蛋白質(zhì)水平相對值分別為:0.612±0.213、3.024±0251、2.482±0.248、2.020±0.220、1.728±0.102、3.086±0.324、2.962±0.264、3.143±0.263。A~E各組CTGF mRNA表達水平相對值和各組CTGF蛋白質(zhì)水平相對值之間均存在統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),B、F、G、H組間均不存在統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
結(jié)論:PD98
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