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1、同濟大學醫(yī)學院碩士學位論文IGFI基因和αSMA基因轉染大鼠肌源性干細胞姓名:陸華君申請學位級別:碩士專業(yè):外科學指導教師:王躍閩20090501AbstractABSTRACTobjecfiveTostudythefeasibilityoftransfectinglGFIandaSMAgcne(theofficialsymbolingenebankisActa2)intomusclederivedstemcellMethods1Rec
2、ombinantplasmidpEFGPIGf’1wastransfectedtomuscle—derivedstemcellsAfter72hours,1week,eellcloneswereobservedwithfluorescentmicroscope2RecombinantplasmidpGC—FUACTA2andpackagingplasmidpHelperl0,pHelper20infects293Tcellsandcol
3、lectvirosome;packaginglentiviralvector,todeterminethevirustiteranddetecttheexpressionthelentiviruswastransfectedintomusclederivedstemcellsAfter72hours,1week,celldoneswereobservedwithfluorescentmicroscopeResults1Muscleder
4、ivedstemcellstransfectedwithIGFIgeneexpressedgreenfluorescentunderfluorescentmicroscopeThegenetransfectionefficiencywas60%after1week2Lentiviralvectorsystempackagedsuccessfullythevirustiterwas2E8,WesternBlotrecealedthatex
5、pressionofACTA2genewasgoodinvitroMuscle—derivedstemcellstransfectedwithACTA2geneexpressedgreenfluorescentunderfluorescentmicroscopeThegenetransfectionefficiencywas80%after1weekConclusion1TheIGF1geneissuccessfullytransfec
6、tedintoMDSCswithlipsomeandthecellsgrowwell2TheACTA2geneissuccessfullytransfectedintoMDSCswithlentivirussystemandthecellsgrowwellKeyWordsmusclederivedstemcells(MDSC);insulinlikegrowthfactorl(IGFI);asmoothmuscleactin(asmoo
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