《牛蜘蛛腿綜合征檢測 pcr方法》征求

1、ICS 65.020.30CCS B43N Y中華人民共和國農業(yè)行業(yè)標準 中華人民共和國農業(yè)行業(yè)標準NY/T XXXX-XXXX牛蜘蛛腿綜合征檢測 PCR 方法Detection of arachnomelia syndrome in cattle—PCR method(公開征求意見稿 公開征求意見稿)202X- 202X- - 發(fā)布 202X- 202X- - 實施 實施中

2、華 人 民 共 和 國 農 業(yè) 農 村 部 發(fā) 布NY/T XXXX-202X牛蜘蛛腿綜合征檢測 PCR 方法1 范圍本文件描述了牛蜘蛛腿綜合征檢測的 PCR 方法。本文件適用于西門塔爾牛、瑞士褐牛、中國西門塔爾牛、新疆褐牛、三河牛、蜀宣花牛及其他含有西門塔爾牛和/或褐牛血緣個體的蜘蛛腿綜合征的遺傳檢測。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于

3、本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 GB/T 19495.2 轉基因產品檢測 實驗室技術要求GB/T 27642 牛個體及親子鑒定微衛(wèi)星 DNA 法農業(yè)部 2031 號公告—14轉基因動物及其產品成分檢測 普通牛（Bos taurus）內標準基因定性PCR方法NY/T 2695 牛遺傳缺陷基因檢測技術規(guī)程NY/T 3446 奶牛短脊椎畸形綜合征檢測PCR法3 術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3

4、.1 牛蜘蛛腿綜合征 arachnomelia syndrome，AS一種牛的先天性、致死性骨骼系統(tǒng)畸形、臨床表現(xiàn)四肢外觀像“蜘蛛腿”的常染色體遺傳病。注：患病犢牛頭部畸形，包括下頜骨短，上頜骨向下凹陷，上頜前端呈圓錐形，并向上微微翹起；脊柱向背側彎曲，明顯“蜷縮駝背”狀態(tài)，但肋骨和肩胛骨正常；四肢僵直，骨骼畸形，后肢畸形尤為嚴重，掌骨和跖骨向內側彎曲與身體平行或呈一定角度，長骨骨端正常，長骨骨干比正常犢牛細而脆弱，外徑和內徑偏小但骨密

5、質部分的寬度未發(fā)生改變，四肢外觀像“蜘蛛腿”。[來源：NY/T 2695-2015，3.9，有修改]4 原理根據(jù)褐牛 AS 致因突變位點和西門塔爾牛 AS 致因突變位點的側翼序列設計特異性引物，并在上游引物 5’端分別引入 HEX 和 FAM 熒光標記，隨后對 DNA 樣品進行 PCR 擴增，獲得與預期片段大小一致的 PCR 產物。PCR 產物變性解鏈后，經毛細管電泳技術進行片段分離，依據(jù)熒光吸收峰圖鑒定片段長度，判定基因型，確定待檢樣