東亞飛蝗免疫與繁殖相關基因表達分析.pdf

1、東亞飛蝗是世界性的農業(yè)害蟲，對農業(yè)危害嚴重。線紋折麻蠅（Blaesoxipha lapidosa）是一種蝗蟲寄生性蠅類，可寄生多種蝗蟲。本文通過尋找東亞飛蝗免疫與繁殖相關表達基因，來研究線紋折麻蠅幼蟲與東亞飛蝗的寄生關系，以及東亞飛蝗免疫與繁殖之間的權衡關系，為更好的理解東亞飛蝗在生態(tài)環(huán)境中的適應策略提供理論基礎。
　　本文利用第二代高通量測序技術，對注射葡聚微珠、人工感染藤黃微球菌、人工寄生線紋折麻蠅幼蟲后的東亞飛蝗雌成蟲的卵巢

2、與脂肪體混合建庫測序，獲得8G的東亞飛蝗卵巢與脂肪體混合的轉錄組數(shù)據庫。并采用兩種方法----無參拼接法和有參拼接法對轉錄組數(shù)據庫進行拼接，通過Trinity軟件獲得54,740條unigenes，通過Cufflinks軟件獲得38,181條unigenes。然后對所有的unigenes進行注釋。為了探究線紋折麻蠅寄生后，東亞飛蝗在免疫與繁殖方面的基因表達差異，分別進行了葡聚微珠、藤黃微球菌、線紋折麻蠅處理4小時和6天的東亞飛蝗雌成蟲的

3、卵巢和脂肪體混合建庫，進行數(shù)字表達譜測序，并做兩次DGE測序重復。通過對這12個DGE的比較共獲得61條序列，包含四個方面的內容：能量、異物識別、免疫和繁殖。能量相關基因是昆蟲儲存蛋白（Hexamerin-like protein）。異物識別相關基因是革蘭氏陰性菌表面識別蛋白（GNBP），革蘭氏陽性菌表面識別蛋白（PGRP），凝集素（Lectin）和載脂蛋白-3b（Apolipophorin-3b）。免疫相關基因是雙翅殺菌肽（Lm-di

4、ptericin），絲氨酸蛋白酶（Serine proteinase），磷酸絲氨酸蛋白磷酸酶（Phosphoserine phosphatase），絲氨酸蛋白酶抑制劑前體（Serpin precursor），絲氨酸蛋白酶抑制劑（Serpin），酚氧化酶原（Pro-phenoloxidase），酚氧化酶亞基（Phenoloxidase subunit A3），溶菌酶（Lysozyme），細胞色素P450（Cytochrome P450），

5、toll類似蛋白（Tolloid-like protein2），toll蛋白（Protein toll），toll蛋白受體（Toll-like receptor）。繁殖相關基因是保幼激素（Juvenile hormone），卵黃原蛋白（Vitellogenin）。并且比較了篩選得到的差異基因的表達值，用以預測差異基因的功能，發(fā)現(xiàn)藤黃微球菌在進入東亞飛蝗體內4小時，東亞飛蝗體內的殺菌作用便達到高峰期，但包囊反應在4小時還未有明顯反應，要比