電針足三里對小鼠Ⅳ型超敏反應防治效應及免疫調節(jié)機制研究.pdf

1、目的：
　　越來越多的研究表明，電針療法有抗過敏和抗炎作用，但對于遲發(fā)性超敏反應（DTH）的作用機制不明。本研究旨在通過觀察電針對小鼠DTH治療效果，試探討電針足三里防治Th1介導的DTH的效應機制。
　　方法：
　　使用雌性C57BL/6小鼠，共32只，體重約為18-20g，將小鼠通過編號查詢隨機數字表隨機分為對照組8只、模型組(OVA-DTH組)8只、電針治療組（DTH+EA組）8只、假電針組（DTH+Sham組）

2、8只共4組。測量小鼠足墊厚度，使用蘇木精和伊紅（HE）染色觀察足墊炎性細胞浸潤情況；酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）檢測血清 OVA特異性抗體 IgG和IgE水平，并檢測足墊組織勻漿上清炎癥細胞因子（IFN-γ，TNF-α，IL-4和IL-5）水平；流式細胞儀檢測各組脾臟CD4+IFN-γ+T細胞和CD4+IL-4+T細胞數；蛋白質印跡法檢測脾臟分離純化的T細胞T-bet與GATA-3蛋白表達，并比較各組間的差異。
　　結果：

3、r>　　通過組織形態(tài)學觀察，與模型組相比，電針治療組能明顯減小 OVA導致的小鼠足墊厚度（P<0.05），假電針組與模型組相比無明顯差異（P＞0.05）;電針治療組小鼠足墊組織真皮層炎性細胞浸潤與聚集水平明顯低于模型組（P<0.01），假電針組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）；與模型組比較，電針治療組可顯著減輕OVA導致的小鼠足墊表皮層腫脹（P<0.05）。
　　通過酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）檢測，與模型組相比，電針治

4、療組可顯著抑制血清OVA特異性抗體IgG水平和IgE水平（P<0.01），假電針組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）；與模型組比較，電針治療組小鼠足墊組織 Th1類細胞因子水平（如 IFN-γ和 TNF-α）顯著降低（IFN-γ：P<0.05，TNF-α：P<0.01），假電針組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）；對比模型組，電針治療組和假電針組小鼠足墊組織 Th2類細胞因子（IL-4，IL-5）水平無顯著差異（P>0.05）。

5、
　　通過流式細胞學的檢測，與對照組比較，模型組中脾 CD4+IFN-γ+T細胞明顯增加（P>0.05），同時與對照組、模型組相比，電針治療組脾CD4+IFN-γ+T細胞數量明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01），假電針組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）；而對比對照組、模型組和電針治療組三組間脾CD4+IL-4+T細胞計數水平無明顯差異（P>0.05）；依據脾CD4+IFN-γ+T細胞和脾CD4+IL-4+T細胞計數的

6、變化水平，與對照組、模型組相比，電針治療組的 DTH小鼠脾 Th1/Th2細胞比率（即脾CD4+IFN-γ+T細胞數/脾CD4+IL-4+T細胞數）降至正常值附近，且與模型組相比，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　通過蛋白質印跡法（Westen blot）檢測，與對照組比較，模型組T-bet蛋白活性增強，而電針治療組T-bet蛋白活性減弱，對GATA-3則無顯著影響（P>0.05）；通過T-bet/GATA-3比率的統(tǒng)計分