天然有機(jī)多糖SCPP11對(duì)胰島素抵抗細(xì)胞的影響及初步機(jī)制研究.pdf

1、有機(jī)多糖是一類由10個(gè)及10個(gè)以上單糖組成的天然大分子化合物。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)五味子多糖具有較好的生物活性，包括抗腫瘤、抗氧化、降血糖和降血脂等。糖尿病作為一種以高血糖為特點(diǎn)的終身慢性疾病，嚴(yán)重危害患者的身心健康。目前，臨床應(yīng)用的降血糖化學(xué)藥物均存在著副作用，因此，從天然產(chǎn)物中尋找研發(fā)具有輔助降血糖的功能食品或輔助降血糖用藥成為了科研工作者的研究熱點(diǎn)之一。五味子是木蘭科植物五味子干燥果實(shí)，具有滋陰補(bǔ)腎，鎮(zhèn)靜安眠等作用，屬于可用于保健食品

2、名單的植物。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，五味子粗多糖具有調(diào)節(jié)四氧嘧啶致糖尿病小鼠的空腹血糖值及脂代謝平衡的活性。SCPP11是由五味子粗多糖純化得到的重均分子量為17.93 kDa的天然有機(jī)多糖，具有免疫調(diào)節(jié)的作用，但關(guān)于其對(duì)胰島素抵抗細(xì)胞的影響及其初步機(jī)制研究尚未報(bào)道。因此，本文研究SCPP11對(duì)正常BRL肝細(xì)胞葡萄糖消耗的影響及機(jī)制；建立胰島素抵抗BRL肝細(xì)胞模型，考察SCPP11對(duì)胰島素抵抗BRL肝細(xì)胞的影響及機(jī)制；建立胰島素抵抗L6肌

3、細(xì)胞模型，考察SCPP11對(duì)胰島素抵抗L6肌細(xì)胞的影響及機(jī)制，為天然有機(jī)多糖SCPP11的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　(1)采用正常BRL肝細(xì)胞，研究天然有機(jī)多糖SCPP11的細(xì)胞毒性、對(duì)葡萄糖消耗的影響及機(jī)制。結(jié)果表明：25-400μg/mL的SCPP11不會(huì)引起B(yǎng)RL肝細(xì)胞的毒性；50、100和200μg/mL SCPP11可顯著降低BRL細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖的含量，促進(jìn)BRL肝細(xì)胞葡萄糖消耗；1

4、00μg/mL SCPP11可顯著上調(diào)磷酸化IRS1、PI3K、Akt和Glut4蛋白及其基因的表達(dá)?？梢姡琒CPP11可顯著增加BRL肝細(xì)胞的葡萄糖消耗，其可能的作用機(jī)制為SCPP11通過(guò)激活磷酸化IRS1，增強(qiáng)其胰島素敏感性，并上調(diào)PI3K、Akt和GLUT-4蛋白和基因的表達(dá)促進(jìn)其葡萄糖消耗。
　　(2)建立胰島素抵抗BRL肝細(xì)胞模型，研究SCPP11對(duì)BRL肝細(xì)胞胰島素抵抗的影響及機(jī)制，并通過(guò)阻斷PI3K蛋白表達(dá)后考察其對(duì)

5、Glut4蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果表明：25-400μg/mL的SCPP11可顯著增加胰島素抵抗BRL肝細(xì)胞的葡萄糖消耗；50和100μg/mLSCPP11可顯著上調(diào)磷酸化IRS1、PI3K、Akt和Glut4蛋白和基因的表達(dá)；阻斷PI3K蛋白表達(dá)后，SCPP11對(duì)Glut4蛋白表達(dá)沒(méi)有顯著
　　的影響?？梢?，SCPP11可促進(jìn)胰島素抵抗BRL肝細(xì)胞的葡萄糖消耗，改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，其機(jī)制為SCPP11可激活I(lǐng)RS1的表達(dá)，增強(qiáng)其胰島

6、素敏感性，并通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路上調(diào)Glut4蛋白和基因的表達(dá)，改善胰島素抵抗。
　　(3)建立胰島素抵抗L6肌細(xì)胞細(xì)胞模型，研究SCPP11對(duì)L6肌細(xì)胞胰島素抵抗的影響及機(jī)制，并通過(guò)阻斷PPAR-γ蛋白表達(dá)后考察其對(duì)Glut4蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果表明：6.25-400μg/mL的SCPP11可顯著增加胰島素抵抗L6肌細(xì)胞的葡萄糖消耗；25和50μg/mL SCPP11可顯著上調(diào)AMPK、PPAR-γ和Glut4蛋白和

7、基因的表達(dá)；阻斷PPAR-γ蛋白表達(dá)后，SCPP11可極顯著上調(diào)Glut4蛋白的表達(dá)。可見，SCPP11可促進(jìn)胰島素抵抗L6肌細(xì)胞細(xì)胞的葡萄糖消耗，改善其胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，其機(jī)制為SCP11上調(diào)AMPK和PPAR-γ蛋白和基因表達(dá)，并通過(guò)非PPAR-γ通路上調(diào)Glut4蛋白和基因的表達(dá)，增強(qiáng)其胰島素敏感性及葡萄糖消耗，改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。的影響?？梢?，SCPP11可促進(jìn)胰島素抵抗BRL肝細(xì)胞的葡萄糖消耗，改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，其機(jī)制為SCP

8、P11可激活I(lǐng)RS1的表達(dá)，增強(qiáng)其胰島素敏感性，并通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路上調(diào)Glut4蛋白和基因的表達(dá)，改善胰島素抵抗。
　　(3)建立胰島素抵抗L6肌細(xì)胞細(xì)胞模型，研究SCPP11對(duì)L6肌細(xì)胞胰島素抵抗的影響及機(jī)制，并通過(guò)阻斷PPAR-γ蛋白表達(dá)后考察其對(duì)Glut4蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果表明：6.25-400μg/mL的SCPP11可顯著增加胰島素抵抗L6肌細(xì)胞的葡萄糖消耗；25和50μg/mL SCPP11可顯著上調(diào)A