海帶多糖干預(yù)高脂暴露誘發(fā)LDLr---小鼠動脈粥樣硬化發(fā)生的調(diào)控機制.pdf

1、海帶是一種重要的海產(chǎn)蔬菜，具有防止動脈粥樣硬化的保健功效。由于泡沫化細(xì)胞的形成是動脈粥樣硬化初始階段的重要標(biāo)志，本文主要開展了海帶多糖對高脂暴露誘發(fā)LDLr-/-小鼠動脈粥樣硬化活性與巨噬細(xì)胞源性泡沫化細(xì)胞形成的作用效果及其機制研究，主要實驗結(jié)果如下:
　　(1)海帶多糖的分離純化及其結(jié)構(gòu)鑒定:采用DEAE-Cellulose離子交換色譜、Sephacryl S-500凝膠滲透色譜技術(shù)對海帶粗多糖迸行分離純化，獲得均一性多糖組分L

2、JP61A，分子量為1.96×106 Da。單糖組成分析顯示，LJP61A主要由甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，分子摩爾比為1∶1.85∶2.92。多糖甲基化和NMR結(jié)果表明，LJP61A結(jié)構(gòu)的重復(fù)單元主要包含→3，6)-α-D-Manp-(1→、→4)-α-D-Manp-(1→、→4)-2-O-acetyl-β-D-Glcp-(1→、→4)-β-D-Glcp-(1→、→6)-4-O-SO3-β-D-Galp-(1→、→6)-β-D-Gal

3、p-(1→、→3)-β-D-Galp-(1→和末端糖殘基α-D-Glcp-(1→。
　　(2)LJP61A的體內(nèi)抗動脈粥樣硬化活性研究:采用高脂暴露誘發(fā)LDLr-/-小鼠動脈粥樣硬化實驗?zāi)Ｐ?，研究了LJP61A的抗動脈粥樣硬化活性。病理學(xué)研究顯示，海帶多糖LJP61A能顯著抑制高脂飼料誘導(dǎo)LDLr-/-小鼠動脈粥樣硬化的發(fā)生，呈量效關(guān)系。當(dāng)LJP61A劑量為200mg/kg·day時，血清TC、TG、HDL-C和LDL-C含量分別

4、比模型組減小了73.9％、73.6％、30.4％和84.1％;研究還發(fā)現(xiàn)，LJP61A顯著抑制了高脂飲食誘導(dǎo)的血管促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的產(chǎn)生及其mRNA的表達(dá)。結(jié)果表明，LJP61A能以調(diào)控脂質(zhì)代謝和抑制炎性兩個方面干預(yù)高脂暴露誘發(fā)的LDLr-/-小鼠動脈粥樣硬化的發(fā)生。
　　(3)LJP61A對oxLDL誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞源性泡沫化形成的抑制作用及調(diào)控機制:采用oxLDL誘導(dǎo)泡沫化細(xì)胞模型，LJP61A在濃度為25

5、 ug/mL時明顯減少細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)聚集。LJP61A不僅顯著降低PPARγ、CD36、ACAT1的mRNA表達(dá)水平，而且能顯著增加ABCA1、SR-B1 mRNA的表達(dá)及其蛋白水平，這些反應(yīng)均呈量效關(guān)系，指明LJP61A能通過PPARγ信號通路調(diào)控細(xì)胞對脂蛋白的吸收、轉(zhuǎn)化與流出。研究還發(fā)現(xiàn)，LJP61A通過mTOR顯著抑制了ox-LDL對TLR2/4介導(dǎo)的MAPK和NFκB信號通路的激活作用，進(jìn)而抑制了其下游效應(yīng)分子TNF-α和IL-1