高鹽飲食對(duì)Wistar大鼠血壓變異性和腎臟的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討高鹽飲食對(duì)Wistar大鼠血壓變異性和腎臟的影響及機(jī)制研究。
　　方法：65只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（n=24，0.5％NaCl飼料）和8%高鹽組（n=41，8%NaCl飼料），各組大鼠自由飲食、飲水，實(shí)驗(yàn)為期39周。高鹽干預(yù)24周后，依據(jù)大鼠尾動(dòng)脈收縮壓測(cè)定結(jié)果及干預(yù)不同分為以下組：分組1：高鹽干預(yù)組，將8%高鹽組分為高鹽血壓正常組（HSN，n=7）和高鹽高血壓組（HSH，n=34），其中 HSH組大鼠隨機(jī)

2、分為高鹽高血壓1組（HSH1組，n=11）和高鹽高血壓組2（HSH組2，n=23）；對(duì)照組隨機(jī)分為對(duì)照組1（n=12）、對(duì)照組2（n=12）。對(duì)照組1、HSN組和HSH1組大鼠24周取材。分組2：高鹽+替米沙坦干預(yù)組：隨機(jī)將高鹽高血壓組2（HSH組2，n=23）分為高鹽高血壓2組（HSH2組，n=13，8%NaCl飼料）、高鹽高血壓2組+替米沙坦組（HSH2+T組，n=10，8%NaCl飼料+替米沙坦）。對(duì)照組2（n=12，0.5%Na

3、Cl飼料）、HSH2組和HSH2+T組大鼠繼續(xù)飼養(yǎng)15周，并于實(shí)驗(yàn)39周取材。采用智能大小鼠無(wú)創(chuàng)測(cè)壓儀按實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)測(cè)量各組大鼠血壓，計(jì)算各組大鼠短時(shí)、長(zhǎng)時(shí)BPV。實(shí)驗(yàn)?zāi)?jì)算各組大鼠雙腎肥大指數(shù)；HE和Masson染色法觀察大鼠腎臟形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)和纖維化程度；分別采用比色法、免疫比濁法和苦味酸法測(cè)定大鼠24h尿β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）、24h尿微量白蛋白、末次血尿肌酐；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定大鼠腎臟皮質(zhì)血管緊張素1-7

4、（Ang1-7）水平；免疫組化法和Western blotting法分別檢測(cè)大鼠腎臟損傷分子-1（Kim-1）、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（ACE2）、Mas受體（MasR）蛋白的分布及蛋白量。
　　結(jié)果：高鹽干預(yù)24周時(shí)，與對(duì)照組1相比，8%高鹽組大鼠尾動(dòng)脈收縮壓、舒張壓、短時(shí)收縮壓變異性（SBPV）、短時(shí)舒張壓標(biāo)準(zhǔn)差（DSD）、長(zhǎng)時(shí)SBPV和長(zhǎng)時(shí)舒張壓變異性（DBPV）均增高（P<0.05），HSN組大鼠長(zhǎng)時(shí)SBPV增高（P<0.05

5、），HSH組大鼠尾動(dòng)脈收縮壓、舒張壓、短時(shí)和長(zhǎng)時(shí)SBPV、短時(shí)DSD和長(zhǎng)時(shí)DBPV均增高（P<0.05）；與HSN組相比，HSH組大鼠尾動(dòng)脈收縮壓、舒張壓、長(zhǎng)時(shí)SBPV和長(zhǎng)時(shí)DBPV均增高（P<0.05）。高鹽+替米沙坦干預(yù)15周后，與對(duì)照組2相比，HSH2組大鼠尾動(dòng)脈收縮壓、舒張壓、短時(shí)SBPV、短時(shí)DBPV和長(zhǎng)時(shí)SBPV增高（P<0.05）；經(jīng)替米沙坦干預(yù)5周后，與HSH2組相比，HSH2+T組大鼠尾動(dòng)脈收縮壓、舒張壓、短時(shí)BPV、

6、長(zhǎng)時(shí)BPV無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)?zāi)琀E、Masson染色結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，HSN組、HSH1組、HSH2組大鼠腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)有不同程度的損害及纖維化；經(jīng)替米沙坦干預(yù)15周后，與HSH2組相比，HSH2+T組大鼠腎臟雙腎肥大指數(shù)未見(jiàn)明顯改善，且腎小球及腎間質(zhì)纖維化程度明顯增高（P<0.05）。高鹽干預(yù)24周時(shí)，與對(duì)照組1相比，HSN組、HSH組大鼠24h尿NAG和尿微量白蛋白明顯增高（P<0.05），HSH1組和HSN組大鼠24h尿肌酐

7、清除率明顯降低（P<0.05）、腎臟皮質(zhì)Ang1-7水平降低（P<0.05）、ACE2蛋白的蛋白量減少（P<0.05）、MasR蛋白的蛋白量降低但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， HSH1組大鼠腎臟皮質(zhì) Kim-1蛋白的蛋白量增多（P<0.05）；與HSN組相比，HSH1組大鼠腎臟皮質(zhì)Ang1-7水平降低（P<0.05）。高鹽+替米沙坦干預(yù)15周后，與對(duì)照組2相比，HSH2組大鼠雙腎肥大指數(shù)增高（P<0.05），24h尿肌酐清除率明顯降低（P<0.05）

8、，腎臟皮質(zhì) Ang1-7水平降低（P<0.05），ACE2蛋白和MasR蛋白的蛋白量減少（P<0.05），Kim-1蛋白的蛋白量增多（P<0.05）；與HSH2組相比，HSH2+T組大鼠腎臟皮質(zhì)Kim-1蛋白的蛋白量增多（P<0.05），ACE2蛋白、MasR蛋白的蛋白量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：⑴長(zhǎng)期高鹽飲食可致高鹽高血壓組大鼠長(zhǎng)時(shí)SBPV、DBPV增高，且早于其血壓升高；⑵長(zhǎng)期高鹽飲食可致血壓正常組大鼠長(zhǎng)時(shí)SBPV增高，且增高