慢性脊髓損傷SEP與病理相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過椎管內(nèi)放置聚氨酯壓塊建立慢性脊髓壓迫模型，探討SEP在該模型相應(yīng)時間點與病理變化相關(guān)性。
　　方法：取健康成年雄性SD大鼠96只，依次編號，隨機將其分為實驗組（n=48）與對照組（I組，n=48），其中實驗組大鼠行頸6節(jié)段椎板切除，暴露脊髓，并將可膨脹高分子材料放置于頸5節(jié)段椎管內(nèi)左后方側(cè)，建立慢性脊髓壓迫模型；對照組中大鼠僅切除頸6節(jié)段椎板。在成功建立模型后第1天、2天、3天、7天、10天、14天、21天、28天，分別

2、記錄相應(yīng)時間節(jié)點大鼠的BBB評分、SEP信號及脊髓損傷病理變化，并分別記錄為A組、B組、C組、D組、E組、F組、G組、H組，將對照組設(shè)為I組。觀察并記錄實驗組大鼠BBB評分，將SEP信號進行處理分析得出數(shù)據(jù),通過HE染色觀察受壓脊髓組織病理變化情況，采用TUNEL染色檢測損傷脊髓組織中細胞凋亡情況，并觀察細胞凋亡與壓迫時間的關(guān)系,最后通過免疫組化檢測GFAP蛋白在壓迫脊髓節(jié)段中的表達。
　　結(jié)果：⑴BBB評分：大鼠建模后至術(shù)后第3

3、天期間，單側(cè)（左）前肢活動嚴重受限，步態(tài)異常，術(shù)后第3天（C組）BBB評分最低，術(shù)后第3天組（C組）與7天組（D組）存在統(tǒng)計學(xué)差異，隨后實驗組（A-H組）中大鼠評分逐漸增高，術(shù)后10天（E組）進入平臺期時，行為學(xué)評分接近對照組（I組），但差別無統(tǒng)計學(xué)意義；⑵SEP信號：實驗組（A-H組）中大鼠SEP均可觀察到不同程度的信號波幅值降低、潛伏期延長，其中術(shù)后14天組（F組）尤為顯著,與E組、G組及I組比較存在統(tǒng)計學(xué)差異，隨著壓迫時間延長SE

4、P信號曲線幅值升高，潛伏期縮短，波形逐漸穩(wěn)定，進入平臺期，但未能恢復(fù)至正常形態(tài)；⑶HE染色：所有實驗組顯微鏡下可見脊髓受壓處白質(zhì)疏松，出現(xiàn)疏網(wǎng)狀改變，部分可見脫髓鞘改變；神經(jīng)細胞受壓水腫；所有實驗組中標本均可見到不同程度的神經(jīng)細胞數(shù)目減少，還可觀察到膠質(zhì)細胞出現(xiàn)不同程度腫大，小膠質(zhì)細胞大量增生并包繞神經(jīng)細胞的現(xiàn)象，其中術(shù)后1、2、3天組（A-C組）脊髓標本中可見明顯脊髓水腫、液化，術(shù)后7天組中可見脊髓前角運動神經(jīng)元細胞出血壞死，數(shù)量減少

5、，大量空泡形成；⑷TUNEL染色：觀察到大鼠術(shù)后實驗組中凋亡神經(jīng)元陽性細胞計數(shù)逐漸增多，于術(shù)后14天（F組）達到峰值，并穩(wěn)定在該水平，其與術(shù)后7天組（D組）存在統(tǒng)計學(xué)差異，與術(shù)后21天組（G組）及28天組（H組）計數(shù)無明顯差別；⑸免疫組織化學(xué)：實驗組術(shù)后膠質(zhì)細胞數(shù)量明顯增多，其特征表現(xiàn)為GFAP染色陽性細胞數(shù)量增加及形態(tài)學(xué)變化，GFAP細胞計數(shù)達到峰值，與術(shù)后14天組（F組）及對照組（I組）存在統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05），與術(shù)后28天組

6、（H組）比較無明顯差別。
　　結(jié)論：通過實驗證明，BBB評分：大鼠慢性脊髓損傷模型建立術(shù)后3天內(nèi)評分降低顯著，是聚氨酯壓塊快速膨脹壓迫脊髓，出現(xiàn)脊髓組織水腫。從術(shù)后10天開始，BBB評分進入穩(wěn)定期。SEP是有效評估慢性脊髓損傷的敏感方法，A-F組中大鼠SEP信號波幅逐漸降低，潛伏期逐漸延長，F(xiàn)組信號提示脊髓損傷最嚴重，隨后逐漸恢復(fù)，術(shù)后21日進入平臺期，但未能恢復(fù)正常；HE染色：在建立模型后脊髓組織至術(shù)后14日病變最重，隨后細胞形