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文檔簡介
1、目的:隨著干細(xì)胞的臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用的不斷發(fā)展,研究者們開始探索理想的干細(xì)胞來源,目前研究較多的胚胎干細(xì)胞及成體干細(xì)胞因各自的局限性從而使得它們的臨床應(yīng)用受到很大的限制。經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞是近幾年發(fā)現(xiàn)的新穎的成體干細(xì)胞,具有獲取途徑簡單無創(chuàng),多周期重復(fù)獲取,無倫理爭議,增殖迅速,分化潛能廣等特點。為避免經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)的過程中應(yīng)用異種血清的不可預(yù)知的不良反應(yīng)以及提高經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)效率,建立一種無異種血清的經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞的培
2、養(yǎng)體系用來開展相關(guān)細(xì)胞治療具有重大意義。本實驗旨在探討自體血清替代胎牛血清培養(yǎng)經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞的可行性分析,采用自體血清培養(yǎng)體系收集擴(kuò)增女性的自體經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞避免了培養(yǎng)體系中異種血清的污染,從而為個體化治療已經(jīng)發(fā)生或未來可能發(fā)生的疾病提供一定的儲存保障。
方法:收集20-30歲健康育齡女性的月經(jīng)血,通過密度梯度離心法分離出經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞分別均勻地接種于含10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)體系和含10%自體血清的D
3、MEM/F12培養(yǎng)體系中,觀察細(xì)胞的形態(tài)及增殖特性,并采用CCK-8法繪制生長曲線;比較兩種培養(yǎng)體系培養(yǎng)的經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞的成骨、成脂能力。
結(jié)果:兩種培養(yǎng)體系下的經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞均呈典型的短小梭形生長,均可形成集落。成人自體血清組培養(yǎng)的經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞在增殖速度上接近于胎牛血清組,采用CCK-8法繪制生長曲線,其吸光度值無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。兩種培養(yǎng)體系下的經(jīng)血源性基質(zhì)干細(xì)胞均具有成骨,成脂能力。
結(jié)
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