白藜蘆醇抑制甲狀腺未分化癌細胞增殖的實驗研究.pdf

1、目的:甲狀腺癌作為女性內(nèi)分泌系統(tǒng)第二高發(fā)的惡性腫瘤，其發(fā)病率逐年增高。甲狀腺未分化癌(anaplastic thyroid carcinoma, ATC)，作為甲狀腺癌幾種病理類型中惡性程度最高的一種，盡管近年來隨著腫瘤治療領(lǐng)域的不斷發(fā)展，但是在過去的50年以來，ATC的中位生存率并沒有得到提高。因此，尋找創(chuàng)新并且有效的治療方法或藥物顯得尤為迫切。白藜蘆醇(Resveratrol，RSV)，來源于葡萄等植物中的一個天然化合物，被報道在抗

2、炎癥，抗衰老，抗氧化，抗腫瘤等領(lǐng)域起作用，但關(guān)于其在甲狀腺未分化癌的作用尚不明確。因此在我們的研究中，我們考察了白藜蘆醇對于甲狀腺未分化癌的增殖的影響，并進一步考察了白藜蘆醇對甲狀腺未分化癌再分化標志物TTF2，PAX8的表達的影響，并研究了可能的機制。
　　研究方法:在我們的研究中，我們利用甲狀腺未分化癌細胞FRO，考察了白藜蘆醇對其增殖作用的影響，通過流式分析白藜蘆醇對其細胞周期和細胞凋亡的影響，并考察了其對相關(guān)蛋白的表達量變

3、化。另一方面，我們考察了白藜蘆醇對甲狀腺未分化癌再分化標志物TTF2，PAX8的表達的影響，并研究了可能的機制。
　　結(jié)果:1.白藜蘆醇對FRO的抑制作用呈劑量-時間依賴性，且RSV對FRO細胞的IC50為79.96μmol/L。接著，我們考察了白藜蘆醇抑制FRO的可能機制。白藜蘆醇處理48小時后，降低了蛋白PCNA和CyclinD1的蛋白表達量。另外，我們同時通過流式被檢測了RSV（0-120μmol/L）處理24h后細胞周期的

4、變化情況，結(jié)果顯示細胞周期S期的積聚，G0-G1和G2-M的減少，除此之外，G2/G1的比值也降低了。與對照組相比，在RSV120μmol/L處理的情況下，處于S期的細胞平均百分比由43.13％增加到70.17％。接著我們檢測了發(fā)現(xiàn)細胞凋亡相關(guān)的蛋白cleaved-PARP，cleaved-caspase3都增高了。同時發(fā)現(xiàn)，抗凋亡蛋白BCL-2降低。除此之外，為了定量凋亡細胞，我們利用PI/FITC染色檢測凋亡細胞發(fā)現(xiàn)，隨著RSV劑量

5、的增加，凋亡細胞逐漸增多。2.白藜蘆醇處理后增加甲狀腺癌再分化標志物TTF2，PAX8的表達。3.接下來我們發(fā)現(xiàn)，RSV可以抑制β-catenin的蛋白表達，于是我們繼續(xù)檢測Wnt/β-catenin信號通路的其他蛋白，GSK-3β，pGSK-3β，CyclinD1的表達量，發(fā)現(xiàn)，隨著RSV濃度的增加，GSK-3β蛋白表達量增加，pGSK-3β，CyclinD1的蛋白表達量降低。除此之外，利用免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)，RSV處理后，β-cate

6、nin在細胞核的聚集降低，而在細胞質(zhì)的表達有增強。4.我們檢測發(fā)現(xiàn)，SB處理后，TTF2，PAX8的表達降低。緊接著，我們對于SB處理后ATC細胞，繼續(xù)加入不同濃度梯度的RSV，發(fā)現(xiàn)，隨著RSV濃度的逐漸提高，TTF2.PAX8的表達量又開始逐漸增多。
　　結(jié)論:RSV能夠通過細胞周期和促進凋亡的方式抑制甲狀腺未分化癌細胞的增殖。另一方面，白藜蘆醇能夠促進甲狀腺癌再分化標志物TTF2，PAX8的表達，且已一種抑制Wnt/β-cat