丹磺酰白藜蘆醇抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖的初步研究.pdf

1、目的:研究白藜蘆醇的衍生物丹磺酰白藜蘆醇抑制人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖的作用;并初步探討在此過程中的分子機(jī)制。
　　方法:化學(xué)合成白藜蘆醇(Resveratrol,RES)的衍生物丹磺酰白藜蘆醇(Resveratrol dansyl,RES-DAN);用MTT法分析RES-DAN以及RES對MCF-7細(xì)胞增殖的抑制作用;同時用平皿克隆法比較細(xì)胞的克隆生成差異;流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度RES-DAN誘導(dǎo) MCF-7細(xì)胞24h后的凋亡;

2、間接免疫熒光法研究RES-DAN與caveolin-1(CAV-1)的共定位模式;Western blot實(shí)驗(yàn)分析不同濃度RES-DAN作用于MCF-7細(xì)胞后CAV-1、P53、PTEN、MDM2蛋白的表達(dá)水平變化。
　　結(jié)果:MTT比色法顯示在同一濃度 RES以及 RES-DAN可以時間依賴性抑制MCF-7細(xì)胞增殖,且RES-DAN比同濃度RES具有更強(qiáng)抑制MCF-7細(xì)胞增殖作用;平皿克隆法結(jié)果顯示RES-DAN可以濃度依賴性抑

3、制MCF-7細(xì)胞集落形成。流式細(xì)胞術(shù)的結(jié)果顯示RES-DAN能夠誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡,且隨著濃度的增加,凋亡率也逐漸增加;化學(xué)合成 RES的衍生物 RES-DAN,結(jié)合間接免疫熒光技術(shù)檢測胞內(nèi)RES-DAN與CAV-1的分布及定位情況,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):CAV-1與RES-DAN兩者分布區(qū)域相同。Western blot檢測結(jié)果顯示,隨著藥物RES-DAN作用濃度的增加CAV-1蛋白表達(dá)增多,P53、PTEN、活化水平也逐漸增強(qiáng);而MDM2表