雷珠單抗與視網(wǎng)膜激光光凝術(shù)治療ROP療效及ROP致病基因全外顯子測(cè)序分析.pdf

1、第一部分雷珠單抗與視網(wǎng)膜激光光凝術(shù)治療ROP療效分析
　　目的：探討298例早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病患兒首次采用雷珠單抗玻璃體腔注藥術(shù)或視網(wǎng)膜激光光凝術(shù)兩種治療方法的治療療效。
　　方法:本研究采用回顧性病例對(duì)照研究，對(duì)2007年10月至2016年1月收治在陸軍總醫(yī)院附屬八一兒童醫(yī)院的298例需要首次接受雷珠單抗玻璃體腔注藥術(shù)或者視網(wǎng)膜激光光凝術(shù)治療的早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病患兒臨床資料進(jìn)行分析，比較兩不同治療組中患兒臨床特點(diǎn)是否存在差異，病變

2、控制情況、治療次數(shù)、病變最終治愈率、遠(yuǎn)期預(yù)后等是否存在不同，從而對(duì)首次采用的兩種治療方法的治療療效進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　結(jié)果：本研究中符合納入標(biāo)準(zhǔn)需要首次接受雷珠單抗玻璃體腔注藥術(shù)及視網(wǎng)膜激光光凝術(shù)治療的早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病患兒為298例，其中首次選擇的治療方法為雷珠單抗注藥術(shù)124例（41.61%）、激光術(shù)174例（58.39%）。根據(jù)病變分區(qū)不同，124例首次采用雷珠單抗注藥術(shù)治療人數(shù)中Ⅰ區(qū)病變?nèi)藬?shù)有72例，占58.06%，Ⅱ區(qū)病變?nèi)藬?shù)5

3、2例，占41.94%。174例首次采用視網(wǎng)膜激光術(shù)治療人數(shù)中Ⅰ區(qū)病變?nèi)藬?shù)有30例，占17.24%，Ⅱ區(qū)病變?nèi)藬?shù)135例，占77.59%，兩治療組在病變的分區(qū)比較中存在差異性（?2=49.310，P<0.001）。首次采用的兩治療組中 APROP與非APROP構(gòu)成比比較中無(wú)差異性（?2=0.154，P=0.695）。兩治療組患兒在出生體重、出生胎齡及其他多種臨床特點(diǎn)的比較中均為 P>0.05，無(wú)顯著性差異。在病變控制率的比較中兩治療組在首

4、次治療后無(wú)差異（?2=0.059，P=0.808），且兩者分別在Ⅰ區(qū)和Ⅱ區(qū)不同病變區(qū)域中首次治療后的病變控制率比較中也未見(jiàn)顯著性差異（?2=1.436,P=0.231;?2=0.751，P=0.386）。不同病變類(lèi)型比較中，兩治療組分別在急進(jìn)型ROP與非急進(jìn)型ROP首次治療后病變控制率比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（急進(jìn)型ROP?2=0.475，P=0.491；非急進(jìn)型ROP?2=2.534，P=0.111）。首次采用兩種治療方法后兩組治療次數(shù)的比

5、較上也無(wú)顯著差異（?2=0.818，P=0.664），且病變的最終治愈率上兩者基本一致。通過(guò)檢驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)胎膜早破、壞死性小腸結(jié)腸炎、外院轉(zhuǎn)入ROP、病變分區(qū)、病變類(lèi)型是否為APROP與病變控制情況相關(guān)，經(jīng)Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)胎膜早破、壞死性小腸結(jié)腸炎、病變類(lèi)型是否為APROP是影響病變控制的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P<0.05）。在激光術(shù)組隨訪人數(shù)較少的前提下，兩治療組遠(yuǎn)期預(yù)后比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　

6、　1.本研究中納入比較的兩治療組中患兒的臨床基本特點(diǎn)一致，因而兩治療組在治療療效上具有可比性。
　　2.注藥術(shù)組中Ⅰ區(qū)病變所占比例高于激光術(shù)組中Ⅰ區(qū)病變所占比例，注藥術(shù)組Ⅰ區(qū)病變多，而激光術(shù)組以Ⅱ區(qū)病變?yōu)橹鳌?br>　　3.兩治療組在首次治療后的病變控制率、病變治療次數(shù)及病變的最終治愈率的比較上并沒(méi)有顯著性差異，也說(shuō)明兩者在短期治療效果上基本一致。
　　4.通過(guò)隨訪發(fā)現(xiàn)兩治療組在首次治療后遠(yuǎn)期治療預(yù)后結(jié)果比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。<

7、br>　　5.在兩治療組臨床治療效果無(wú)差異的前提下，注藥術(shù)治療操作簡(jiǎn)單、無(wú)需麻醉及有創(chuàng)通氣因而在臨床治療選擇中更優(yōu)于激光術(shù)組。
　　第二部分ROP致病基因全外顯子測(cè)序分析
　　目的：通過(guò)實(shí)驗(yàn)篩選可能與早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病致病相關(guān)基因，分析其致病性，為下一步功能性驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。
　　方法:對(duì)10例早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病患兒血液樣本進(jìn)行全基因外顯子測(cè)序，應(yīng)用Phenolyzer系統(tǒng)預(yù)測(cè)與早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病相關(guān)基因，將兩者進(jìn)行比對(duì)，通過(guò)基因

8、表型驅(qū)動(dòng)分析方法，找到表型與基因的相關(guān)性，篩選可能與早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病發(fā)生相關(guān)的候選致病基因，并根據(jù)研究結(jié)果分析其致病性。
　　結(jié)果：本研究數(shù)據(jù)顯示測(cè)序質(zhì)量及測(cè)序深度均滿足研究要求，全基因外顯子測(cè)序獲得的基因總數(shù)為8211個(gè)，其中發(fā)生缺失突變的有687個(gè)，占8.37%，插入突變的有500個(gè)，占6.09%，單核苷酸突變（Single nucleotide variation，SNV）有7024個(gè)，占85.54%。缺失突變及插入突變主要以

9、移碼突變及非移碼突變?yōu)橹?，而SNV主要以錯(cuò)義突變?yōu)橹?，突變的?lèi)型不同導(dǎo)致最終編碼蛋白質(zhì)功能亦不同。而通過(guò)Phenolyzer系統(tǒng)預(yù)測(cè)出與ROP疾病相關(guān)基因有50種，將全基因測(cè)序結(jié)果與Phenolyzer系統(tǒng)預(yù)測(cè)的基因進(jìn)行表型驅(qū)動(dòng)分析后發(fā)現(xiàn)LRP5基因可能為早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病致病基因。之后針對(duì)研究中基因突變類(lèi)型、基因表達(dá)部位、人群中基因頻率、是否存在致病性等進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)該基因突變?yōu)殄e(cuò)義突變，可導(dǎo)致11號(hào)染色體1區(qū)3帶第2次亞帶中外顯子23的

10、第2900位密碼子中間位置的堿基有G突變?yōu)門(mén)，最終導(dǎo)致第967位氨基酸由半胱氨酸變?yōu)楸奖彼?，并且該基因突變?yōu)轱@性雜合突變，在三大人群中基因頻率均<0.01,提示基因突變具有研究意義，且通過(guò)SIFT、Polyphen2、Mutation Taster軟件對(duì)該基因的致病性進(jìn)行預(yù)測(cè)，提示該基因是具有致病性的。因而預(yù)測(cè)LRP5基因突變可能導(dǎo)致ROP的發(fā)生。
　　結(jié)論：10例研究樣本中1例樣本中攜帶有LRP5基因突變，其可能為導(dǎo)致ROP疾