基于GC-MS技術(shù)的嬰兒巨細(xì)胞病毒肝炎脾虛濕困證的代謝模式研究.pdf

1、目的:
　　研究巨細(xì)胞病毒(Cytomegalovirus，CMV)肝炎脾虛濕困證患兒血漿和尿液的代謝特征、受干擾的代謝物和代謝通路，探討CMV肝炎脾虛濕困證的證候?qū)嵸|(zhì)。
　　方法:
　　選取符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的CMV肝炎脾虛濕困證患兒20例設(shè)為脾虛濕困組。同時(shí)選取同時(shí)期同年齡段正常兒童20例設(shè)為正常組。采集兩組兒童的血漿和尿液，應(yīng)用氣相色譜-三重四級桿質(zhì)譜儀(gas chromatography-mass spectrom

2、etry，GC-MS)檢測代謝產(chǎn)物，利用XCMS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)提取和數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化，導(dǎo)入SIMCA-P軟件進(jìn)行多變量分析，并建立主成分分析(Principal Component Analysis，PCA)和正交偏最小二乘法判別分析(Orthogonal PartialLeast Squares Discriminant Analysis，OPLS-DA)數(shù)學(xué)模型，篩選能有效表征嬰兒CMV肝炎脾虛濕困證的差異性代謝物，并使用MetaboAnal

3、yst分析可能涉及的相關(guān)代謝通路來綜合評價(jià)CMV肝炎脾虛濕困證的證候本質(zhì)。
　　結(jié)果:
　　1.血漿樣本代謝組學(xué)模式分析結(jié)果顯示，在所構(gòu)建的PCA及OPLS-DA模型中正常組血漿樣本提取物與嬰兒CMV肝炎脾虛濕困證組樣本能夠良好區(qū)分，說明脾虛濕困證組的代謝物特征與正常組具有明顯差異。初步鑒定了22個(gè)差異性代謝物作為潛在的生物標(biāo)記物，其中乳酸、L-丙氨酸、辛酸、L-異亮氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸、絲氨酸、L-蘇氨酸、氨基丙二酸、

4、蛋氨酸、焦谷氨酸、戊酸、L-谷氨酸、鳥氨酸、L-賴氨酸、L-酪氨酸、肌醇、硬脂酸、L-色氨酸和膽固醇在CMV肝炎脾虛濕困證患兒血漿中呈上調(diào)趨勢，而3-羥基丁酸、乙二胺四乙酸在CMV肝炎脾虛濕困證患兒血漿中呈下調(diào)趨勢。
　　2.尿液樣本代謝組學(xué)模式分析結(jié)果顯示，在所構(gòu)建的PCA及OPLS-DA模型中正常組尿液樣本提取物與嬰兒CMV肝炎脾虛濕困證組樣本能夠良好區(qū)分，說明脾虛濕困證組的代謝物特征與正常組具有明顯差異。初步鑒定了9個(gè)差異性

5、代謝物作為潛在的生物標(biāo)記物，其中甘氨酸、L-蘇氨酸、L-賴氨酸、D-甘露醇、D-葡萄糖酸、棕櫚酸、尿酸、硬脂酸在CMV肝炎脾虛濕困證患兒尿液中呈上調(diào)趨勢，而檸檬酸在CMV肝炎脾虛濕困證患兒尿液中呈下調(diào)趨勢。
　　結(jié)論:
　　1.本實(shí)驗(yàn)所采用的GC-MS技術(shù)能夠?qū)MV肝炎患兒的血漿、尿液進(jìn)行代謝輪廓分析，并且能夠區(qū)分和闡釋脾虛濕困證組與正常組不同的代謝特征。
　　2.CMV肝炎脾虛濕困證患兒血漿和尿液中主要存在氨基酸代