β細(xì)胞素對肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響及機制研究.pdf

1、原發(fā)性肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是我國常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。它具有發(fā)展快、預(yù)后差的特點。肝癌易于出現(xiàn)早期轉(zhuǎn)移,是造成肝癌預(yù)后差的重要原因,所以對其轉(zhuǎn)移機制的研究一直是肝癌研究的熱點。β細(xì)胞素(betacellulin,BTC)是表皮細(xì)胞生長因子(epidermal growth factor,EGF)家族成員之一。近年來的研究提示BTC可能介入了腫瘤生長發(fā)展的生物學(xué)過程。本實驗擬對 BTC在肝癌細(xì)

2、胞和組織中的表達異常及其對肝癌的作用和機制進行研究。
　　目的：
　　檢測BTC在肝癌細(xì)胞和與正常肝細(xì)胞、肝癌組織與癌旁的表達異常,確定BTC對肝癌的侵襲性作用,并研究其調(diào)控機制。
　　方法：
　　1.通過RT-PCR和Western blot測定4種肝癌細(xì)胞系(Huh7、HepG2、SMCC-7721、MHCC97-H)正常肝細(xì)胞系(HL-7702)中BTC的表達。
　　2.通過免疫組化染色的方法對比肝癌

3、組織和癌旁組織中 BTC的表達并闡述其對肝癌病理特征的影響。
　　3.對SMCC-7721、MHCC97-H細(xì)胞通過siRNA下調(diào)BTC的表達和在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入重組人BTC的方法,分別采用MTT法和Transwell遷移、侵襲實驗來研究BTC對肝癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲的影響并進行機制分析。
　　結(jié)果：
　　1.BTC在肝癌細(xì)胞系(Huh7、HepG2、SMMC-7721、MHCC97H)中的表達明顯高于正常肝細(xì)胞系(

4、HL-7702),并且隨著肝癌細(xì)胞系侵襲能力的增強而增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　2.BTC在肝癌組織及其附近存在高表達現(xiàn)象,并且當(dāng)腫瘤直徑≥3厘米,癌組織浸潤包膜是也存在表達差異,有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P<0.05);
　　3.通過siRNA下調(diào)BTC降低了SMCC-7721和MHCC97-H的增殖、遷移、侵襲能力,培養(yǎng)液中BTC的加入增強了SMCC-7721和MHCC97-H的增殖、遷移、侵襲能力,并且明確了B