豐富環(huán)境改善血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)和空間記憶能力及其機(jī)制研究.pdf

1、背景與目的：近年來由于人民群眾生活質(zhì)量的改善，心腦血管疾病的發(fā)生率也逐漸升高，由此導(dǎo)致血管性癡呆（VaD）的發(fā)病率也隨之上升。目前在所有癡呆類型中，VaD發(fā)病率排名第二，僅低于阿爾茨海默?。ˋD），它在給病人帶來生活上的困擾之外，也給社會和家庭造成了沉重的負(fù)擔(dān)，目前臨床上關(guān)于VaD病人的治療方法仍十分有限。近年來，對于豐富環(huán)境（EE）的研究日益增多，發(fā)現(xiàn)其能增強(qiáng)神經(jīng)的可塑性，在多種神經(jīng)精神疾病中已經(jīng)被證實有一定的治療作用。在本研究中，我

2、們擬探討 EE的干預(yù)是否能夠提升 VaD大鼠的學(xué)習(xí)及空間記憶能力以及其可能的內(nèi)在作用機(jī)制。
　　方法：本實驗采用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法（Bilateral common carotid occlusion，2VO）建立SD（Sprague-Dawley）大鼠的VaD模型。采用健康成年的雄性SD大鼠，隨機(jī)分為4個組：假手術(shù)（sham)組、2VO組、假手術(shù)+豐富環(huán)境（sham+EE）組和2VO+豐富環(huán)境(2VO+EE)組。2VO組和2VO

3、+EE組的大鼠進(jìn)行2VO手術(shù)。有兩種不同的飼養(yǎng)環(huán)境在本實驗中被運用：標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)環(huán)境（SE）和豐富環(huán)境(EE)。Sham組和2VO組的大鼠在SE中飼養(yǎng)4周，而sham+EE組和2VO+EE組的大鼠則在EE中飼養(yǎng)4周。通過Morris水迷宮(MWM)來檢測大鼠的學(xué)習(xí)及空間記憶能力的差異，尼氏染色觀察大鼠神經(jīng)元的存活數(shù)量及形態(tài)學(xué)的改變，TUNEL法測定各組大鼠神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況，采用 Western blot檢測wnt/?-catenin通路中

4、wnt3a、p-GSK-3β、β-catenin的蛋白含量的變化。
　　結(jié)果：（1）在MWM的實驗結(jié)果中，在EE中飼養(yǎng)的2VO+EE組大鼠的逃避潛伏期較SE中飼養(yǎng)2VO組大鼠明顯縮短（P＜0.05），目標(biāo)象限停留時間明顯增加（P＜0.05），在EE中飼養(yǎng)的sham+EE組大鼠逃避潛伏期較SE中飼養(yǎng)的sham組大鼠明顯縮短（P＜0.05）,目標(biāo)象限停留時間明顯增加（P＜0.05），提示 EE可以提高大鼠的學(xué)習(xí)和空間記憶能力。（2）與

5、sham組相比，2VO組大鼠在術(shù)后4周的海馬凋亡細(xì)胞比例明顯增加（P＜0.05），而經(jīng)過EE干預(yù)的2VO+EE組的海馬凋亡細(xì)胞的比例則比2VO組明顯下降（P＜0.05），同時經(jīng)過EE干預(yù)的sham+EE組的海馬凋亡細(xì)胞比例也較 SE中飼養(yǎng)的 sham組大鼠明顯下降（P＜0.05）。（3）與sham組相比，2VO組大鼠在術(shù)后4周的海馬正常存活的神經(jīng)元數(shù)量明顯減少（P＜0.05）。而2VO+EE組在經(jīng)過EE的干預(yù)后存活的神經(jīng)元數(shù)量則2VO組

6、增加（P＜0.05），經(jīng)過 EE干預(yù)的sham+EE組大鼠的海馬存活神經(jīng)元數(shù)量也明顯要高于飼養(yǎng)在 SE環(huán)境中的sham組（P＜0.05）。（5）Western blot的結(jié)果顯示，與SE中飼養(yǎng)4周的 sham組及2VO組大鼠相比，EE中飼養(yǎng)4周的 sham+EE組和2VO+EE組大鼠海馬中 wnt3a、p-GSK-3β、β-catenin蛋白的含量明顯增加（P＜0.05），提示大鼠在經(jīng)歷豐富環(huán)境的過程中伴隨著wnt/β-catenin信