腦立輕膠囊對擬血管性癡呆大鼠空間學習記憶影響的研究.pdf

1、血管性癡呆(vascular dementia，VD)系指在各種腦血管疾病基礎(chǔ)上引起的腦組織損害，并產(chǎn)生以高級神經(jīng)認知功能障礙為主的一組臨床綜合征，是老年期癡呆的主要類型之一，臨床主要表現(xiàn)為認知功能、社會生活能力的減退及情感性格的改變等癥狀，學習記憶能力受損突出，致殘率高，嚴重影響患者的生活質(zhì)量，造成了沉重的經(jīng)濟和社會負擔。現(xiàn)代醫(yī)學對該病尚無特效治療手段，長期治療費用昂貴。 隨著近年來中醫(yī)藥基礎(chǔ)和臨床研究的深入，中醫(yī)藥在防治VD

2、上日益顯示出優(yōu)勢。腦立輕膠囊根據(jù)VD多以“腎精虧虛，瘀阻腦脈”為其主要病機特點，以“補益腎精、化瘀通絡(luò)”為其治則，用肉蓯蓉、山茱萸、三七、銀杏葉、葛根組方而成，在臨床中取得了較好療效。本課題通過動物實驗方法研究腦立輕膠囊對擬VD大鼠空間學習記憶的影響，探討其作用機制，為臨床用本藥治療VD提供理論依據(jù)。 實驗研究分為以下三部分： 1.選用清潔級雄性SD大鼠80只，雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎法(2-VO)建立VD大鼠模型，造模后

3、動物隨機分為腦立輕膠囊高、中，低劑量組和模型組、假手術(shù)組、對照組，每組10只。對照組選用尼麥角林作為對照藥物，動物灌胃給藥，治療期30天。 2.治療期結(jié)束后行Morris水迷宮實驗，通過定位航行實驗、空間探索實驗、可見平臺實驗，檢測治療后模型大鼠的空間學習記憶能力，比較各組之間成績的差異。從行為學上觀察腦立輕膠囊對擬VD大鼠記憶的影響，探討其治療作用。 3.采用4％多聚甲醛經(jīng)心臟灌注，待鼠尾變硬后取腦，石蠟包埋、切片，H

4、E染色觀察各組大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞形態(tài)變化，計數(shù)錐體細胞，比較腦立輕膠囊對大鼠海馬CA1區(qū)錐體細胞的影響；免疫組化法檢測各組大鼠海馬CA1區(qū)與記憶關(guān)系密切的酶-膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)和與突觸相關(guān)蛋白-突觸素(Syn)的表達，比較組間差異，探討腦立輕膠囊對ChAT和Syn表達的影響。大鼠經(jīng)2-VO法造模70只，術(shù)后3天死亡19只；假手術(shù)組造模10只，無死亡。實驗期間又陸續(xù)死亡6只。 實驗結(jié)果顯示：造模后各組大鼠的水迷宮成績

5、較假手術(shù)組明顯下降(p＜0.01)，海馬CA1區(qū)錐體細胞的計數(shù)及膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)和突觸素(Syn)的表達與假手術(shù)組比較亦具有顯著性差異(p＜0.01)，說明經(jīng)2-VO法造模后大鼠的行為學成績、海馬CA1區(qū)錐體細胞及相關(guān)蛋白明顯下降，證實造模成功。高劑量組和對照組的各項結(jié)果相比較無顯著性差異(p>0.05)，高劑量組與模型組及低劑量組結(jié)果相比較具有顯著性差異(p<0.01)，而低劑量組與模型組各項結(jié)果比較改善不明顯(p>0.05

6、)，中劑量組的各項結(jié)果介于高低劑量之間。 實驗結(jié)果說明：雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎(2-VO)造成了大鼠學習記憶障礙和腦組織病理形態(tài)以及相關(guān)蛋白的改變，證明模型成功。中藥腦立輕膠囊可以改善擬VD大鼠的空間學習記憶能力，其機制可能是：對低灌注環(huán)境下的大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元具有保護作用，減輕缺血對其造成的損傷；抑制缺血后模型大鼠海馬CA1區(qū)ChAT和Syn的降低，提高模型大鼠海馬CA1區(qū)ChAT和Syn表達，改善膽堿能神經(jīng)元的功能，促進