鎘誘導(dǎo)小鼠血清膽固醇增加及其分子機(jī)制的研究.pdf

1、鎘是一種具有很強(qiáng)生物毒性的重金屬。它可通過飲食進(jìn)入人體，并在人體內(nèi)積累，造成機(jī)體損傷。鎘在人體內(nèi)積累后不但能導(dǎo)致骨骼畸形，腎臟損傷和癌癥的發(fā)生，而且還能導(dǎo)致機(jī)體脂代謝紊亂，而脂代謝紊亂會(huì)導(dǎo)致心腦血管疾病的發(fā)生。近年來，有越來越多的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)鎘能誘導(dǎo)哺乳動(dòng)物產(chǎn)生心臟病、高血壓等疾病，然而其分子機(jī)制卻不是很清楚。本課題從脂代謝過程中血清膽固醇的運(yùn)輸問題入手，著重研究了鎘是如何導(dǎo)致血清中膽固醇含量發(fā)生變化的，并且通過分子生物學(xué)方法解釋

2、血清中膽固醇含量發(fā)生變化的機(jī)制。
　　本研究以小鼠為模式動(dòng)物，通過喂養(yǎng)小鼠含不同鎘濃度的食物來模擬環(huán)境鎘污染現(xiàn)象，然后取小鼠血清和組織進(jìn)行膽固醇含量的檢測(cè)，并進(jìn)行脂代謝相關(guān)蛋白的檢測(cè)，同時(shí)在細(xì)胞水平進(jìn)行驗(yàn)證。
　　我們首先建立小鼠模型，用含有不同鎘劑量的有脂或無脂飼料（0ppm、10ppm、100ppm、1000ppm）喂養(yǎng)小鼠7天。比較對(duì)照小鼠和鎘暴露小鼠，發(fā)現(xiàn)鎘暴露小鼠血清中膽固醇和甘油三酯顯著上升，且上升幅度與鎘劑量線

3、性相關(guān)，脂肪組織中膽固醇下降顯著，且下降幅度與鎘劑量線性負(fù)相關(guān)。有脂飼料喂養(yǎng)小鼠肝臟中膽固醇上升，但不呈劑量依賴關(guān)系；無脂小鼠肝臟中膽固醇略微下降。分析膽固醇代謝相關(guān)蛋白ABCA1、OSBP、LDLR、HMGCR，結(jié)果表明鎘處理后膽固醇輸出途徑的兩個(gè)蛋白，ABCA1蛋白上升，OSBP蛋白下降，并且在HepG2細(xì)胞和Huh7細(xì)胞上得到驗(yàn)證。鎘處理后能導(dǎo)致人細(xì)胞HepG2、Huh7培養(yǎng)基上清中膽固醇量上升。RNAi干擾技術(shù)沉默ABCA1的表

4、達(dá)逆轉(zhuǎn)了鎘對(duì)細(xì)胞膽固醇輸出的促進(jìn)。同樣，過表達(dá)OSBP能部分逆轉(zhuǎn)鎘對(duì)細(xì)胞膽固醇輸出的促進(jìn)。鎘導(dǎo)致小鼠肝臟、脂肪、腎臟、脾臟、肺中LDLR mRNA顯著下降，但是，膽固醇在小鼠肝臟和脂肪中的變化不一致，所以 LDLR在各個(gè)組織中的功能還有待進(jìn)一步研究。HMGCR是細(xì)胞內(nèi)膽固醇合成途徑的限速酶，鎘導(dǎo)致它在肝臟中的mRNA下降，但是與鎘導(dǎo)致小鼠肝臟中膽固醇的增加不一致，所以 HMGCR在鎘機(jī)體毒性中的作用同樣有待進(jìn)一步研究。
　　由此我