STAT3蛋白水平表達(dá)的高低對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病伊馬替尼治療敏感性的研究.pdf

1、目的：升高或者降低 K562細(xì)胞株中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子與轉(zhuǎn)錄激活因子3(Signal transducer and activator of transcription, STAT3)的表達(dá)，分析其變化對(duì)于CML細(xì)胞的增殖分化及伊馬替尼的治療敏感性有何意義。
　　方法：將三組低表達(dá)和兩組高表達(dá)的重組質(zhì)粒真核表達(dá)載體siRNA-STAT3用脂質(zhì)體Lipofactamin3000轉(zhuǎn)染人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞株，通過嘌呤霉素持續(xù)單克隆篩

2、選，Western-blot印跡法鑒定，進(jìn)而篩選出穩(wěn)定低表達(dá)組（sh-vector、shSTAT3-1、shSTAT3-2）和高表達(dá)組（Overexpression vector、Overexpression）STAT3細(xì)胞株。將處于增殖周期的細(xì)胞經(jīng)不同濃度的伊馬替尼（imatinib, IM)作用后，MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長抑制率，繪制細(xì)胞增殖曲線。同時(shí)Western-blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞株BCR/ABL相關(guān)蛋白P53、HAUSP和P

3、TEN的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：與其對(duì)照組（sh-vector）相比，低表達(dá)STAT3蛋白（shSTAT3-1、shSTAT3-2）的K562細(xì)胞組使用IM治療有著較高的抑制率，在0.1μM、0.25μM、0.5μM和1.0μM作用下，其抑制率達(dá)到了(76.3±1.84)%、(80.4±1.90)%、(84.4±2.61)%和(94.3±0.19)%，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。提高STAT3（Overexpression

4、）蛋白表達(dá)水平后，跟其對(duì)照組（Overexpression vector）相比，在相同濃度梯度 IM作用下，其抑制率在兩組平均下降到（58.2±1.27）%、（63.2±2.32）%、(67.9±1.00)%和(74.1±0.76)%，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。兩對(duì)照組中IM抑制率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。IM治療靶向基因酪氨酸激酶BCR-ABL相關(guān)蛋白表達(dá)中，P53、HAUSP和PTEN蛋白表達(dá)趨勢(shì)和STAT3基本