沙利度胺延緩大鼠慢性移植腎腎病的實驗研究.pdf

1、目的：
　　建立大鼠慢性移植腎腎病模型，研究沙利度胺對慢性移植腎腎病過程中腎小球、腎小管、腎間質(zhì)結(jié)構(gòu)的形態(tài)及功能狀態(tài)變化的影響，探討相關(guān)細(xì)胞因子及合成蛋白的變化，為今后治療慢性移植腎腎病，提高移植腎長期存活率提供新的思路。
　　方法：
　　實驗隨機(jī)分為4組，每組8只。同系移植對照組(A組)，同種移植對照組(B組)，沙利度胺低劑量組100 mg/kg/d(C組)，高劑量組200 mg/kg/d(D組)。A組的供、受者均為

2、SD-SD大鼠。B、C、D組均以Wistar大鼠為供者，SD大鼠為受者。12周后，我們抽取各組大鼠的血清用ELISA法檢測ICAM-1，TNF-α全身炎癥因子的變化情況；處死受體大鼠后，對移植腎標(biāo)本行HE染色，觀察各組大鼠移植腎組織病理學(xué)改變；采用免疫組化和Western blot檢測 TGF-β1、骨橋蛋白(OPN)及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在移植腎組織中蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　一、移植腎病理結(jié)果，A組標(biāo)本腎小

3、球未見明顯增生，腎小管管腔基本正常，腎小管細(xì)胞排列整齊，腎間質(zhì)基未見明顯病變。B組移植腎可見腎小球系膜增生，不同程度腎小管管腔增大、萎縮伴腎小管上皮細(xì)胞脫落，間質(zhì)纖維化，淋巴細(xì)胞浸潤及慢性血管內(nèi)膜炎，表現(xiàn)出經(jīng)典的CAN表現(xiàn)。C組移植腎組織可見部分腎小管上皮細(xì)胞空泡變性，CAN表現(xiàn)較B組輕，D組移植腎組織CAN表現(xiàn)與C組未見明顯差別。
　　二、免疫組化結(jié)果，A組標(biāo)本只有基本不染色，TGF-β1及VEGF基本不表達(dá)。B組 VEGF和T

4、GF-β1在標(biāo)本細(xì)胞中呈陽性表達(dá)，與 A組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。C、D兩組 TGF-β1及 VEGF表達(dá)陽性率明顯低于 B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　三、Western blot半定量分析，B組 OPN表達(dá)量較 A組明顯增加，C組 OPN相對表達(dá)量明顯少于 B組(P<0.05)；D組與C組無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。B組標(biāo)本中VEGF的表達(dá)含量明顯較其他組高(P<0.05)。C、D兩組的VEGF表達(dá)量

5、無明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　四、ELISA結(jié)果：B組 ICAM-1明顯高于 A組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。而C組大鼠的ICAM-1較 B組明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。D組大鼠的ICAM-1(31.23±7.99umol/L)較C組明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。B組TNF-α高于A組(127.88±38.74 vs62.58±20.12umol/L)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<

6、0.05)。而 C組大鼠的TNF-α(106.65±29.89 umol/L)較 B組明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。D組大鼠的TNF-α(73.78±25.42) umol/L)較C組明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.沙利度胺可能通過下調(diào)ICAM-1，TNF-α，TGF-β1，OPN，VEGF等因子及蛋白的表達(dá)，來發(fā)揮其抗炎，抗血管生成，抗移植腎間質(zhì)纖維化及免疫調(diào)節(jié)作用，能減輕慢