沙利度胺對(duì)實(shí)驗(yàn)性矽肺FIZZ1表達(dá)的影響.pdf

1、目的: 觀察實(shí)驗(yàn)性大鼠矽肺形成過程中肺組織FIZZ1蛋白和mRNA表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化，F(xiàn)IZZ1與矽肺形成的關(guān)系以及沙利度胺對(duì)矽肺大鼠肺組織FIZZ1表達(dá)的干預(yù)作用。
　　 方法: SD大鼠54只，隨機(jī)分為3組（對(duì)照組、矽肺組和沙利度胺組），每組18只。矽肺組及沙利度胺組均以氣管內(nèi)注入二氧化硅混懸液（100mg·kg-1）復(fù)制實(shí)驗(yàn)性大鼠矽肺模型，對(duì)照組用同等方法注入同樣體積的生理鹽水制備對(duì)照模型。第二天起沙利度胺組給予沙利度胺（10

2、0 mg·kg-1）飼料喂養(yǎng)，其余兩組在相同條件下給予普通飼料喂養(yǎng)。造模后第7、30、60天各組隨機(jī)選擇6只大鼠放血處死，取肺組織進(jìn)行HE 染色、羥脯氨酸含量測(cè)定、免疫組織化學(xué)染色、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，觀察實(shí)驗(yàn)性大鼠矽肺的發(fā)病過程，肺組織中FIZZl蛋白、mRNA表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化及其與肺膠原蛋白含量的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 (1)羥脯氨酸測(cè)定結(jié)果：正常肺組織在第7天、30天、60天各個(gè)時(shí)間點(diǎn)羥脯氨酸含量無明顯增

3、加；而矽肺組從第7天開始逐步升高，第30天較對(duì)照組明顯升高，第60天升高更加顯著；沙利度胺組羥脯氨酸含量變化與矽肺組基本一致，但各個(gè)時(shí)間點(diǎn)含量均低于矽肺組，高于對(duì)照組。
　　 (2)HE染色：對(duì)照組未見明顯病變。矽肺組各期均有肺泡炎改變，以第7天最重，可見肺泡間隔水腫，毛細(xì)血管增多，肺泡腔內(nèi)大量炎性細(xì)胞滲出；第30天可見肺泡巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎性細(xì)胞明顯減少，肺泡間隔內(nèi)成纖維細(xì)胞明顯增多，基質(zhì)明顯增寬，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，可見以Ⅱ期

4、病變?yōu)橹鞯奈Y(jié)節(jié)；第60天肺泡結(jié)構(gòu)進(jìn)一步破壞，彌漫性肺間質(zhì)纖維化，可見孤立或融合的矽結(jié)節(jié)，以Ⅲ期病變?yōu)橹?。以上結(jié)果證實(shí)氣管暴露注入二氧化硅混懸液建立大鼠矽肺模型是成功的。沙利度胺組病理變化過程同矽肺組，但第7天炎性細(xì)胞滲出明顯減少，第60天大鼠肺組織病變以Ⅱ期矽結(jié)節(jié)為主，病變分布范圍亦小于矽肺組。
　　 (3)免疫組化觀察：半定量FIZZ1蛋白結(jié)果顯示在正常肺組織中，F(xiàn)IZZ1弱表達(dá)于肺泡上皮細(xì)胞、細(xì)支氣管上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及血

5、管內(nèi)皮細(xì)胞。矽肺組在第7天上述各種細(xì)胞陽性著色均較對(duì)照組明顯增強(qiáng)，第30天較第7天有所減弱，第60天明顯減弱，但仍強(qiáng)于對(duì)照組；沙利度胺組的大鼠肺組織第7天、第30天及第60天細(xì)胞陽性著色均較對(duì)照組高，但與矽肺組相比，著色減弱，尤以第7天減弱最明顯，但第60天不甚明顯。
　　 (4)熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)：各組肺組織在各個(gè)時(shí)段均有FIZZ1 mRNA的表達(dá)，但在正常肺組織表達(dá)較弱。第7天矽肺組FIZZ1 mRNA顯著增加，第30天

6、時(shí)開始減弱，60天時(shí)明顯減弱，但仍強(qiáng)于對(duì)照組。沙利度胺組在第7天、第30天及第60天FIZZ1 mRNA的表達(dá)均較對(duì)照組高，但低于矽肺組，尤其是第7天的表達(dá)降低最明顯，但第60天不甚明顯，與免疫組化觀察顯示出同樣的變化趨勢(shì)。
　　 結(jié)論: FIZZl蛋白、mRNA在實(shí)驗(yàn)性大鼠矽肺發(fā)病過程中呈現(xiàn)明顯的動(dòng)態(tài)變化，矽肺早期尤其是肺泡炎階段FIZZl一過性異常表達(dá)旺盛；沙利度胺能在一定程度上降低矽肺大鼠肺組織中膠原蛋白含量和FIZZl的