版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、研究目的:(1)研究不同種屬、不同干預方式、不同時間點大鼠體重、血壓以及血漿Hcy水平;(2)檢測不同時間點大鼠血漿細胞因子水平、腦組織相關基因mRNA、蛋白以及腦組織病理學檢測;(3)檢測不同時間點WKY-C/M/T及SHR-C/M/T外周血Th17、Treg淋巴細胞比例;(4)觀察大鼠頭顱MRI影像學改變。
研究內(nèi)容與方法:(1)將60只SHR、60只WKY按照隨機分配的原則分為6組, SHR-C組、SHR-M以及SHR-
2、T組,WKY-C組、WKY-M組以及WKY-T組,每組20只,C組給予普通飼料16周、M組給予添加2%蛋氨酸16周、T組給予添加2%蛋氨酸飼料喂養(yǎng)8周,自第9周第1天給予VitB120.09mg/kg/d、葉酸4mg/kg/d、VitB612mg/kg/d灌胃治療,共計16周,并在分別于試驗開始第一天(0周)、第4周、第8周、第12周、第16周測量大鼠的體質(zhì)量,應用無創(chuàng)鼠尾測壓法測量大鼠SBP,應用ELISA方法檢測大鼠血漿Hcy水平;
3、(2)分別于試驗第8周、第12周、第16周應用ELISA法檢測大鼠血漿細胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-6水平,于試驗第8周、第12周、第16周應用PCR法檢測大鼠腦組織IL-10、IL-17、Foxp3、RORγt mRNA表達,第16周應用Western Blot法檢測大鼠腦組織Foxp3、RORγt蛋白表達,于試驗第16周處死大鼠,進行腦組織病理學觀察;(3)分別于試驗的第0周、第4周、第8周、第12周及第16周應
4、用Beckman Cytomics FC500流式細胞儀對WKY-C/M/T及SHR-C/M/T組大鼠外周血Th17、Treg淋巴細胞進行分析;(4)應用Bruker7.0T高場強小動物核磁共振掃描儀對24周齡WKY-C/M/T及SHR-C/M/T進行頭顱常規(guī)MRI檢測。
結果:(1)試驗16周內(nèi)無論WKY還是SHR,體重都呈現(xiàn)上升趨勢,以WKY-C最為明顯,高蛋氨酸飲食能夠使體重生長減緩,而葉酸和維生素B飲食對高蛋氨酸飲食導
5、致的體重減緩影響不大;SHR-C/M/T3組大鼠的SBP和血漿Hcy水平明顯高于WKY-C/M/T3組,蛋氨酸干預的M組和T組明顯高于正常飲食的C組,經(jīng)過葉酸和VitB6、VitB12聯(lián)合治療后的T組低于同時期M組血壓,并且這種差異在第8周之后更加顯著;(2)WKY組的IL-6水平保持不變,并且WKY-C、WKY-M和WKY-T沒有統(tǒng)計學差異,SHR-C組IL-6水平持續(xù)上升,SHR-T組的IL-6水平持續(xù)下降,第12周,SHR-M組顯
6、著高于SHR-T組,第16周,SHR-M組顯著高于SHR-C組和SHR-T組,第12和16周SHR組和WKY組的IL-6水平存在統(tǒng)計學差異。WKY-M組的IL-17水平持續(xù)上升,在第16周顯著高于WKY-C組和WKY-T組,SHR-C組和SHR-M組IL-17水平呈上升趨勢,SHR-M組上升更快,SHR-T組先稍微上升后下降,在12周達到最高水平47.55 pg/ml。WKY-C、SHR-C組IL-10基本保持不變,WKY-M、SHR-
7、M組IL-10持續(xù)下降,且SHR組下降較迅速;WKY-T、SHR-T組IL-10不斷上升,且SHR組上升較快,在第16周,WKY-M、SHR-M IL-10均低于同種屬C組和T組,且這種差異SHR組更明顯。8-16周,WKY-C組和SHR-C組血清中TGF-β保持不變,WKY-M組和SHR-M組TGF-β緩慢下降,WKY-T組和SHR-T組TGF-β緩慢上升,在第16周,無論大鼠WKY組還是高血壓大鼠SHR組, M組TGF-β都顯著低于
8、C組和T組。WKY-C組和SHR-C組RORγt mRNA水平基本保持不變,WKY-M組和SHR-M組RORγt mRNA水平持續(xù)上升,SHR組-M上升較迅速,WKY-T組和SHR-T組RORγt mRNA不斷下降,SHR-T組下降較快;WKY-C組和SHR-C組IL-17 mRNA水平基本保持不變,WKY-M組和SHR-M組IL-17 mRNA水平持續(xù)上升,SHR-M組上升較迅速,WKY-T組和SHR-T組IL-17 mRNA不斷下降
9、,12周之后下降速度減緩,SHR-T組下降較快;WKY-C組、SHR-C組、WKY-M組和SHR-M組Foxp3 mRNA水平基本保持不變,WKY-T組Foxp3 mRNA水平持續(xù)上升,SHR-T組Foxp3的mRNA水平先迅速上升后下降,第12周達到峰值。WKY-C組、WKY-M組、WKY-T組、SHR-C組和SHR-M組IL-10mRNA水平基本不變, SHR-T組先迅速上升后迅速下降,第12周達到峰值,且顯著高于SHR-C組和SH
10、R-T組。WKY和SHR腦組織中,RORγt在C組和T組水平較高,M組表達較低,F(xiàn)oxp3的表達情況恰恰相反,在C組和T組水平較低, M組表達較高。病理組織染色顯示,WKY-M組Th17陽性細胞遠遠高于對WKY-C組,經(jīng)過葉酸和維生素B治療后WKY-T組Th17陽性細胞減少,與WKY-C組基本持平, WKY-M組Treg陽性細胞遠遠低于對照組WKY-C組,經(jīng)過葉酸和維生素B治療后WKY-T組Treg陽性細胞增多,但是仍然少于WKY-C組
11、;SHR組Th17細胞和Treg細胞變化趨勢WKY相似,WKY-M組和SHR-M組部分區(qū)域血管輕度增生,SHR-M組部分區(qū)域神經(jīng)細胞增多, WKY-M組部分區(qū)域神經(jīng)細胞減少甚至萎縮。結論 Hcy的致病作用在mRNA水平、蛋白水平、血漿水平、組織水平均得到證實,且經(jīng)葉酸、VB族治療后,其致病作用呈現(xiàn)出減弱趨勢;(3)0周到第16周,WKY-C及SHR-C組Tregs細胞逐漸升高, WKY-M及SHR-M組Tregs細胞例逐漸下降,WKY-
12、T及SHR-T組Tregs細胞出現(xiàn)先降低后升高趨勢(第8周為轉(zhuǎn)折點);而WKY-C及SHR-C組Th17細胞逐漸降低,WKY-M及SHR-M組Th17細胞逐漸升高,WKY-T及SHR-T組Th17細胞呈現(xiàn)出先升高后降低趨勢;(4)6組共計24只24周齡大鼠均未出現(xiàn)明顯缺血性腦病表現(xiàn)。
結論:(1)高蛋氨酸飲食可以成功造成大鼠血漿Hcy水平升高,以SHR升高為著,同時HHcy可以造成不同中屬于大鼠血壓升高,經(jīng)葉酸和VitB6、V
13、itB12聯(lián)合治療后可降低血漿Hcy水平同時起到降低血壓的作用;(2)Hcy的致病作用在mRNA水平、蛋白水平、血漿水平、組織水平均得到證實,且經(jīng)葉酸、VB族治療后,其致病作用呈現(xiàn)出減弱趨勢;(3)高蛋氨酸可造成大鼠外周血Tregs細胞比例下降,Th17細胞比例升高,經(jīng)葉酸、VitB6及VitB12聯(lián)合治療干預后, Hcy的作用減弱,是Tregs細胞比例升高、Th17細胞比例下降;(4)24周齡WKY/SHR大鼠并未出現(xiàn)缺血性腦血管病表
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- h型高血壓的規(guī)范治療
- h型高血壓與腦卒中
- h型高血壓健康教育
- h型高血壓防治措施
- h型高血壓 ppt課件
- h型高血壓高血壓新指南新亮點
- 高血壓中的免疫學機制研究.pdf
- h型高血壓研究新進展
- “h型”高血壓的防治醫(yī)學課件
- 高血壓對腦出血后腦損傷的影響的實驗研究.pdf
- H型高血壓的中醫(yī)證素證型研究.pdf
- “H型”高血壓中醫(yī)證型特點的臨床研究.pdf
- 急性貧血對老年高血壓大鼠術后認知功能及腦損傷的影響.pdf
- 自發(fā)性高血壓大鼠的腦白質(zhì)損傷及其相關機制.pdf
- 血腫消方治療高血壓腦出血后腦損傷的臨床研究.pdf
- 老年H型高血壓患者的臨床特點.pdf
- H型高血壓中醫(yī)證型分布規(guī)律的臨床研究.pdf
- h型高血壓的規(guī)范化治療
- “H型”高血壓與中醫(yī)證型的相關性研究.pdf
- 高尿酸誘導大鼠高血壓發(fā)病機制的研究.pdf
評論
0/150
提交評論