鐵皮石斛水溶性多糖的分離純化及體外抗氧化活性研究.pdf

1、鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo.)為蘭科(Orchidaceae)石斛屬(Dendrobium)多年附生草本植物，是傳統(tǒng)名貴中藥材，其所富含的石斛多糖具有提高機(jī)體免疫、抗腫瘤、抗氧化等藥理作用。由于多糖成分復(fù)雜，分離難度大，目前為止，尚未有對(duì)鐵皮石斛多糖進(jìn)行系統(tǒng)性的研究。因此，對(duì)鐵皮石斛多糖進(jìn)行系統(tǒng)的分離純化，并對(duì)各均一組分多糖進(jìn)行組成分析及結(jié)構(gòu)解析，研究其體外抗氧化活性，探討其與結(jié)構(gòu)

2、之間存在的關(guān)系，對(duì)鐵皮石斛的科學(xué)使用具有重要意義。
　　本論文結(jié)合多種多糖分離方法，通過陰離子交換劑柱色譜（DEAE-Cellulose-52）、具分子篩效應(yīng)的丙烯葡聚糖柱色譜（Sephacryl S-200）對(duì)鐵皮石斛水溶性多糖進(jìn)行多級(jí)分離純化，得到3種均一組分的中性多糖DONP1-b、DONP2-a、DONP3-a，以及3種均一組分的酸性多糖DOAP1-d、DOAP2-c和DOAP3-b。
　　通過凝膠色譜(GPC)、氣

3、相色譜(GC)、液相色譜(HPLC)、紫外光譜(UV)、紅外光譜(IR)、核磁氫譜(1H-NMR)以及高碘酸氧化和Smith降解測(cè)定多糖的理化性質(zhì)并推斷多糖一級(jí)結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，3種中性多糖（DONP1-b、DONP2-a、DONP3-a）的分子量范圍分別為661.38 KDa、378.21 KDa和163.55 KDa，3種酸性多糖(DOAP1-d、DOAP2-c、DOAP3-b)的分子量范圍分別為530 KDa、13.8KDa和130

4、.2 KDa。在單糖的組成上，3種中性多糖均由葡萄糖和甘露糖組成，酸性多糖DOAP1-d和DOAP2-c則由葡萄糖、甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖構(gòu)成，DOAP3-b另包含鼠李糖和半乳糖醛酸兩種單糖。紅外光譜顯示:3種中性多糖不含酸性基團(tuán)，3種酸性多糖均含酸性基團(tuán)，且3種中性多糖和DOAP1-d酸性多糖均含有α-呋喃型糖苷，酸性多糖DOAP2-c和DOAP3-b則含有α-吡喃型糖苷。高碘酸氧化、Smith降解及核磁氫譜顯示:中性多糖主要由抗氧

5、化的1→3-構(gòu)型糖基構(gòu)成，而酸性多糖則由可氧化的1→2-構(gòu)型、1→4-構(gòu)型及1→6構(gòu)型糖基構(gòu)成。
　　利用ABTS、清除羥基自由基、清除DPPH自由基、清除NO、還原鐵離子能力以及螯合亞鐵離子實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)6種多糖的體外抗氧化活性發(fā)現(xiàn)，3種酸性多糖的抗氧化活性遠(yuǎn)強(qiáng)于3中性多糖及粗多糖，在高濃度條件下(5 mg·mL-1)，酸性多糖抗氧化活性接近Vc。
　　綜上，本論文較為系統(tǒng)地分離了鐵皮石斛水溶性多糖，得到6種均一多糖，其中包括3